微生物尿酸氧化酶的筛选、酶学性质及重组表达
2018-07-30咸静女郭鑫李波彭海波汪小龙张建业陈刚
咸静女,郭鑫,李波,彭海波,汪小龙,张建业,陈刚
微生物尿酸氧化酶的筛选、酶学性质及重组表达
咸静女,郭鑫,李波,彭海波,汪小龙,张建业,陈刚
中国海洋大学,山东 青岛 266007

金城. 2018酶工程专刊序言. 生物工程学报, 2018, 34(7): 1021−1023.Jin C. Preface for special issue on enzyme engineering (2018). Chin J Biotech, 2018, 34(7): 1021−1023.
尿酸氧化酶 (Urate oxidase,Uox) 是一种催化尿酸氧化为尿囊素的酶,常用于尿酸的检测以及痛风和高尿酸血症治疗。文中从土壤中筛选出一株Uox高产菌株OUC-1,经16S rRNA部分基因序列分析,与苛求芽孢杆菌序列相似度达99%。OUC-1的Uox经纯化后,分析表明该酶反应最适pH和温度分别为10.0和40 ℃;Uox以尿酸为底物反应动力学参数m值为 (0.15±0.04) mmol/L (=5)。Mg2+能够提高该酶性活性,而Zn2+和SDS能强烈抑制该酶的酶活。参考GenBank中苛求芽孢杆菌基因组中的基因序列,成功扩增出基因,通过SWISS-MODEL对Uox空间结构进行预测,推测该酶是同源四聚体,单亚基分子量为35.38 kDa。文中将基因克隆并在大肠杆菌中表达,为后续的Uox的性能改造提供条件和技术支持。
尿酸氧化酶,苛求芽孢杆菌OUC-1,酶学性质,重组尿酸氧化酶
尿酸氧化酶(Urate oxidase, Uox, EC1.7.3.3)是生物体内嘌呤代谢的关键酶,催化尿酸氧化形成尿囊素。研究发现许多物种中有Uox存在,然而在高等哺乳动物尤其是猿和人类体内却缺乏具有生物活性的Uox[1],尿酸在人体内的累积可导致痛风症[2-4]。近年来随着饮食结构和生活方式的改变,摄入嘌呤成分的增多,调查发现成年人痛风发病率呈逐渐上升的趋势[5],同时流行病学和临床研究证实了血液中尿酸升高与心血管疾病的发生有重要的关联[6-7]。
随着研究的深入,在尿酸的检测、痛风和高尿酸症治疗方面,Uox的应用潜力也逐渐被发现[8-9]。……
