潘丽霞，朱婧，王青艳，申乃坤，李亿，杨登峰,2



利用Ⅲ型聚酮合酶CsyB起始单元的底物多样性体内合成csypyrone类化合物

潘丽霞1，朱婧1，王青艳1，申乃坤1，李亿1，杨登峰1,2

1 广西科学院 非粮生物质酶解国家重点实验室 国家非粮生物质能源工程技术研究中心 广西生物质产业化工程院 广西生物炼制重点实验室，广西 南宁 530007 2 广西科学院 广西北部湾海洋研究中心 广西海洋天然产物与组合合成生物化学重点实验室，广西 南宁 530007

金城. 2018酶工程专刊序言. 生物工程学报, 2018, 34(7): 1021−1023.Jin C. Preface for special issue on enzyme engineering (2018). Chin J Biotech, 2018, 34(7): 1021−1023.

作为新型Ⅲ型聚酮合酶，米曲霉来源的CsyB能够依次接受一个起始单元为短链脂肪酰辅酶A、一个延伸单元为丙二酰辅酶A和另一个延伸单元为乙酰乙酰辅酶A的3个底物形成短链的csypyrone B1-3。基于CsyB的晶体结构分析，显示它的活性中心存在一个长约16 Å的能够接受脂肪酰辅酶A结合通道，这个通道很可能能够接受多种底物。为了检测该酶的底物多样性，将基因导入到存在长链脂肪酰辅酶A前体的大肠杆菌中表达。高效液相结果显示，相比对照菌株，重组菌株产生了一系列长链的csypyrone衍生物。利用紫外可见光特征吸收值和高分辨液相色谱-质谱联用仪对这些新产物作了初步分析。对3个具有羟基的csypyrone产物的结构进行了核磁共振一维谱和二维谱的详细鉴定，确定了其羟基的位置。上述结果显示，CsyB具有广泛的底物特异性，不但可以接受多种长链饱和或不饱和脂肪酰辅酶A，还可以接受具有羟基修饰的长链脂肪酰辅酶A作为底物。……