牛 睿,方欢乐,韩宁娟,申瑞洋,罗艳香,刘利兵

(西安培华学院医学院,陕西西安 710125)

神仙草(Mesonachinesis),又名凉粉草、仙草,为唇形科仙草属一年生草本植物。神仙草在我国有广泛分布,常见于江西、广东、福建、广西、陕西等地,为我国民间常用特产中药材,性凉,味甘[1]。《本草纲目》中记载,仙草主治“小儿醡疮,头小而硬者,煮汤浴,并捣敷。丹毒入腹者必危,可饮冷药,及用此洗之,又攉汁滴目,明目去翳”[2]。本属植物中多含有多糖、黄酮、萜类、酚类、有机酸及挥发性成分等种物质,因具有抗氧化、免疫调节、降血脂、降血糖及改善动脉粥样硬化等功效,而被广泛关注[3]。

现代研究表明,神仙草的多糖成分具有提高巨噬细胞活性,增强机体免疫功能,黄酮类的成分具有抑制癌细胞生长和雌激素的作用,酚类成分具有显著的抗氧化功能和预防心脑血管疾病的作用,而果酸类成分能够起到抗炎抗菌[3-4]。此外,神仙草还具有清除超氧阴离子自由基的能力,对活性氧叔丁基过氧化氢诱导的小鼠急性肝损伤有保护作用[4],但是有关于降低血脂和对血流变学的影响等方面的研究还未进行深入研究。

本实验所用神仙草采摘于秦岭北麓关中平原东部的蓝田县地界,在当地被制作成神仙粉用作清热解暑之佳品,且资源丰富、价格低廉、有广阔的产品开发前景[5]。本文旨在研究不同含量的神仙草提取物在对高脂大鼠调节血脂水平,血液流变学改变以及肝损伤等方面的影响,为神仙草的开发利用提供一定的理论依据,也为后续的基础研究奠定一定的基础。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

神仙草 经西安交通大学医学院生药鉴定专业徐文友教授鉴定为正品药材,于6月份采自陕西省蓝田县并晾干;雄性SD大鼠 体重170～230 g,生产许可证号:SCXK(军)2012-0008,由实验动物由第四军医大学实验动物中心提供;大鼠常规饲养饲料 西安交通大学动物中心;维生素D(批号:20160101)、胆酸盐(批号:110728)、胆固醇(批号:111028)、辛伐他汀片(批准文号:国药准字H20010750)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)试剂盒(批号:20160211)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒(批号为:20160207)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)试剂盒(批号为:20160207) 南京建成生物工程研究所。

TGL-16G型台式离心机 上海安亭科学仪器厂;URIT-660型全自动酶标仪 桂林优利特医疗电子有限公司;LBYN6型血液流变仪 北京普利生仪器有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 神仙草溶液的制备 神仙草经除杂,清洗,于日光下晾晒至脱水干燥后备用。准确称取神仙草适量,加20倍双蒸水浸泡过夜,煎煮2 h,6层纱布过滤,浓缩为1 g/mL的生药浸膏,4 ℃冷藏备用[6]。

1.2.2 高脂模型的建立与动物给药方法 将50只雄性SD大鼠,随机分组,分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组、神仙草高、低剂量组,每组10只。所有大鼠以基础饲料预喂养7 d(1周)后,空白对照组继续给予基础饲料喂养,其余各组大鼠给予高脂饲料喂养。

高脂饲料配方如下:3.5%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白糖、12%猪油、78.8%基础饲料,参考文献[5]方法自制高脂饲料,建立高脂大鼠模型。

实验开始时,空白组给予基础饲料喂养,其余各组均给予高脂饲料喂养持续喂养8周。于实验初期,除空白对照组以外,其余大鼠一次性腹腔注射维生素D360万IU/kg。高脂饲料喂养第4周开始,空白对照组和模型组大鼠每天给予一定体积生理盐水灌胃给药,辛伐他汀组每天以5.5 mg/kg辛伐他汀灌胃给药,神仙草低、高剂量组灌胃给药量分别为1.25、2.5 g/kg,每天灌胃给药一次,同时给予高脂饲料持续喂养。

1.2.3 指标检测 实验大鼠末期给药结束后,禁食禁水12 h后,用20%乌拉坦(0.5 mL/100 g)腹腔注射麻醉大鼠。打开腹腔,腹主动脉取血。4500r/min离心10 min,收取上清液,用酶学法检测血脂指标TC、TG、HDC-C、LDL-C,抗氧化指标SOD、MDA,肝损伤指标GOT、GPT;用血液流变仪分别测定全血低切、中切、高切黏度及血浆黏度等。

1.3 数据处理

2 结果与分析

2.1 神仙草对大鼠体重的影响

按照上述实验方法饲养大鼠8周,每周称重一次,对实验前后大鼠体重增量进行分析,考察不同实验条件对大鼠体重增量的影响,结果见表1。由表1可知,实验前后,与空白对照组相比,模型组体重增加显著(p<0.05);与模型组相比,药物组体重增加显著降低(p<0.05)。由此可得,神仙草能够显著降低高脂喂养大鼠体重。

表1 各组大鼠实验前后体重变化Table 1 Changes in body weight of rats before and after intervention

2.2 神仙草对大鼠血脂的影响

由表2可知,与空白对照组相比,模型组TC、TG、LDL-C均显著升高(p<0.05),HDL-C指标明显下降(p<0.05),说明高脂饮食导致高脂血症模型建立成功;与模型组相比较,神仙草高剂量组TC值显著降低(p<0.05),低剂量组TC值有所降低,但差异不显著;神仙草低剂量组TG值和LDL-C值显著降低(p<0.05),高剂量组极显著降低(p<0.01);神仙草低、高剂量组HDL-C值均极显著升高(p<0.01);与模型组相比,神仙草低、高剂量组与辛伐他汀组的大鼠血清LDL-C显著降低(p<0.05),HDL-C显著升高(p<0.05),但神仙草高剂量组对两者的作用最明显(p<0.01)。

表2 神仙草对高脂大鼠血脂的影响Table 2 Effects of Mesona chinensis extract on blood lipid in hyperlipdemic rats

综上所述,神仙草提取物可显著降低高脂大鼠血清中TC、TG、LDL-C,提高HDL-C(p<0.05),尤其是神仙草高剂量组(p<0.01)。

2.3 神仙草对大鼠血清中SOD、MDA的影响

由表3可知,与空白对照组相比,模型组SOD活性下降极显著(p<0.01),MDA值有所升高,但差异不显著;与模型组相比,神仙草高、低剂量组与辛伐他汀组大鼠血清中SOD活性显著升高(p<0.05),MDA含量显著降低(p<0.05);由此可得,神仙草可显著升高高脂大鼠血清中SOD活性,降低MDA含量。

表3 神仙草对高脂大鼠血清SOD和MDA的影响Table 3 Effects of Mesona chinensis extract on SOD and MDA in hyperlidemic rats

2.4 神仙草对大鼠血清中GOT、GTP的影响

由表4可知,与空白对照组相比较,模型组GOT和GPT指标有所升高,但差异不显著;与模型组相比较,神仙草高、低剂量组以及辛伐他汀组的GOT和GPT没有显著性差异。

表4 神仙草对高脂大鼠血清GOT和GPT的影响Table 4 Effects of Mesona chinensis extract on GOT and GPT in hyperlipdemic rats

综上所述,神仙草提取物对大鼠血清中GOT和GPT无明显影响,说明神仙草提取物无造成大鼠肝脏损伤的可能性。

2.5 神仙草对大鼠血液流变学的影响

由表5可知,与空白对照组相比,模型组高、中、低切的全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数明显升高(p<0.05);与模型组相比较,神仙草高、低剂量组与辛伐他汀组的全血粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数均显著下降(p<0.05)。

表5 神仙草对高脂大鼠血液流变学指标的影响Table 5 Effects of mesona chinensis extract on hemorheology in hyperlipdemic rats

综上所述,神仙草提取物可明显降低高脂大鼠全血粘度(高切、中切、低切)、血浆粘度与红细胞聚集指数指标(p<0.05),改善高脂大鼠血液流变学的指标。

3 结论

本实验采用高脂饲料喂养联合维生素D3造模成功后,以神仙草提取物灌胃给药,检测大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C等相关血脂指标,结果显示,神仙草可有效降低大鼠血清中TC、TG的指标(p<0.05),尤其对LDL-C降低作用较明显(p<0.05),并显著提高HDL-C水平(p<0.05)。同时检测到神仙草能明显升高大鼠血清中SOD活性(p<0.05),降低MDA含量(p<0.05)。此外,神仙草提取物可有效减低高脂大鼠血清中全血粘度、血浆粘度和红细胞聚集指数(p<0.05),能够在一定程度上改善因血脂异常引起的血液流变学异常。通过对肝功能是否有损伤常用检测指标GOT、GPT指标进行检测发现,神仙草提取物不会引起GOT、GPT指标升高,由此推断神仙草不会引起严重的肝脏损伤。

4 讨论

高脂血症是由于脂肪代谢异常,其中某几种脂质指标明显高于正常指标,并沉积于血管壁,逐渐引发血管壁动脉粥样硬化[7]。高血脂的发病机制较为复杂,很容易诱发心脑血管等慢性疾病,近几年研究发现,其逐渐成为代谢综合征形成的重要因素之一并引起高度关注[8]。我国高脂血症发病流程呈现明显升高及年轻化的趋势。通过研究发现,治疗高脂血症可使脂肪肝、动脉粥样硬化、冠心病等其他严重心脑血管慢性疾病的发生率下降30%左右,逐渐成为预防心脑血管等慢性疾病发生发展的有效措施[9]。目前临床应用降脂类西药均有肝肾功能损伤的相关报道,因此,寻找并开发能够降低高脂血症血脂指标,改变脂质代谢异常等天然药物,就成为目前较为迫切的目标之一[10]。

国内神仙草资源丰富,价格低廉,在陕西其主要用途还仅仅集中在蓝田周围农村等地作为食品使用[13]。通过研究发现神仙草提取具有降低血脂,升高高密度脂蛋白指标,改善血液流变学损伤的作用。为今后高效提取神仙草有效活性成分基础上,挖掘潜在用途,更好服务于社会,为人类健康事业提供一定的思考。