秦 舒，朱玉蓉

流行病学研究表明，帕金森病（PD）患者需长期服用左旋多巴和卡比多巴，其多种恶性肿瘤的发病率显著低于正常健康人群，包括胃癌、肝癌、胰腺癌、直肠癌、前列腺癌、肺癌等，但黑色素瘤和乳腺癌除外[1]。由此推测，左旋多巴和卡比多巴是否可能具有抗癌作用。因此，针对左旋多巴进行了大量的研究，但实验结果并未证实左旋多巴具有抑制多种恶性肿瘤的作用[2]。但研究发现，卡比多巴的化学结构与苯肼十分相似。苯肼是吲哚胺-2,3-双加氧酶1（IDO1）的一种抑制剂，而IDO1则是细胞内色氨酸降解代谢的主要催化酶，其代谢产物犬尿氨酸又是芳香烃受体(AhR)的生理激活剂[3]。与此同时，大量相关实验表明，AhR参与细胞增殖、凋亡及免疫代谢[4-6]，直接影响肿瘤的黏附、生长、迁移和侵袭。因此，不难提出假设，卡比多巴是否是通过影响AhR的活性来发挥抗癌作用。我国是乙肝大国，每年约有22万人死于原发性肝癌，其死亡率在恶性肿瘤中排名第2[7]。本实验建立肝癌HepG2细胞株的离体模型，通过不同浓度卡比多巴的干预，观察HepG2细胞的增殖能力、AhR的激活以及CYP1A1、CYP1A2、CYP1B1等靶基因转录水平的变化，借此验证卡比多巴是否具有抗癌作用，并探索其可能的药理机制，以期为肝癌的临床治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要细胞及仪器、试剂 人肝癌HepG2细胞株，购自美国典型培养物保藏中心(ATCC)；胎牛血清（德国Biochrom公司）；DMEM高糖培养基（美国Gibco 公司）；卡比多巴、MTT、DMSO（美国 Sigma公司）；自动酶标仪（美国 BIO-RAD 550型）；高容量cDNA合成试剂盒(美国Invitrogen公司)；……