吴异兰，王晗

（1. 福建中医药大学护理学院，福建福州350122；2. 福建医科大学附属协和医院肿瘤科，福建福州350001）

在中国，肺癌的发病率和死亡率均居恶性肿瘤的首位[1]，其中80%以上为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)，70%左右的NSCLC患者在就诊时已失去了手术治疗的机会，化疗是治疗晚期NSCLC的主要手段。紫杉醇是治疗NSCLC的有效药物之一[2]，但其疗效受到耐药问题的影响[3]。白藜芦醇(resveratrol，Res)不但能对人类的鼻咽癌、肺癌、食管癌、胃癌、肝细胞癌、乳腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、表皮癌及白血病等多种肿瘤细胞产生抑制作用[4-7]，还可通过诱导凋亡增强耐药细胞对化疗药物的敏感性[8]。但白藜芦醇对肺癌紫杉醇耐药性的作用国内外鲜有报道，本研究通过建立人肺腺癌紫杉醇耐药细胞A549/Taxol-R，观察白藜芦醇作用后A549/Taxol-R细胞对紫杉醇敏感性的改变，并检测凋亡相关蛋白的表达，探讨白藜芦醇影响A549/Taxol-R细胞紫杉醇敏感性的分子机制。

1 材料与方法

1.1 主要材料和试剂

人肺腺癌细胞A549，购于中国科学院上海细胞生物研究所；白藜芦醇(98%，HPLC)购于西安赛德公司，紫杉醇购于美国百时美施贵宝公司，Ham’s F12培养基、胎牛血清购于美国HyClone公司，DMSO、MTT购于美国Sigma公司，Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒购于凯基生物公司，细胞培养瓶、培养板购于美国Corning公司，兔抗人 β-actin单抗、兔抗人Caspase-3 单抗、兔抗人Bcl-2单抗、兔抗人Bax单抗购于美国Cell Signaling Technology公司，羊抗兔二抗购于上海碧云天生物技术有限公司。

1.2 方法

1.2.1 人肺腺癌紫杉醇耐药细胞A549/Taxol-R的构建在含有10%胎牛血清的 H am’s F12培养基中培养人肺腺癌细胞A549，并置于37℃、CO2体积分数为5%的培养箱中备用。……