蔡艺煌，邓小玲，黄文霞，黄洁，纪晴， *，许铭炎，*

（1．厦门医学院口腔系，厦门医学院附属口腔医院，福建厦门361002；2．厦门大学医学院基础部，福建厦门361002）

当今世界，癌症已成为严重威胁人类健康的重大疾病之一。在所有恶性肿瘤中，口腔恶性肿瘤占比约为3%，其中口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)则占90%[1]，并且其发病率在年轻群体中(小于40岁)呈现增加趋势[2]。在中国台湾地区，口腔癌位列男性癌症死亡第4位，而咀嚼槟榔是引发口腔癌的重要因素之一，其中每年每10万人就有6人死于口腔癌[3]。此外，现代人长期高脂高蛋白及低纤维的饮食习惯容易造成消化系统的功能紊乱，进而能引起口腔内有害菌群生长，提高了口腔癌的发病率[4]。

血清应答因子(serum response factor，SRF)是一个在生物体内广泛表达的转录因子，其在多种细胞和肿瘤基质中能与c-Fos/JunB、MRTFs、E-/VE-钙黏着素/β-联蛋白、RhoA和肌动蛋白协同作用，在平滑肌的生理调控、胚胎干细胞早期基因激活、细胞增殖、分化、迁移以及干细胞的定向和血管生成等过程中发挥重要作用[5-12]。而目前，SRF在口腔恶性肿瘤中的研究较少，本研究通过构建pLKO.1-hSRF慢病毒敲减质粒，并成功感染口腔鳞癌细胞SAS，验证了其能在SAS细胞中敲减SRF mRNA 和 蛋白的表达水平，获得SRF低表达口腔鳞癌细胞株，为后续口腔恶性肿瘤的研究奠定了基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞与载体慢病毒敲减质粒pLKO.1-TRC cloning vector及293T细胞由厦门大学生命科学学院李博安教授惠赠。SAS细胞购自日本细胞库。

1.1.2 主要试剂和仪器限制性内切酶、DNA分子量Marker、cDNA反转录试剂盒(TaKaRa公司)；……