刘丹，焦良波，张文，王心怡，陈涛，胡卫，*

（1．三峡大学医学院国家中医药管理局中药药理/肿瘤科研三级实验室，湖北宜昌443002；2．三峡大学附属第二人民医院，湖北宜昌443002；3．宜昌市第二人民医院，湖北宜昌443002）

原发性肝癌(primary hepatic carcinoma，PHC)是我国最常见的恶性肿瘤之一，虽然近年来各种疗法层出不穷，但由于肝癌的高转移和复发率，其5年生存率极低[1]。肿瘤干细胞(cancer stem cells，CSCs)学说认为 ， CSCs是导致肿瘤复发、转移及耐药性的关键所在[2-3]。因此，针对肿瘤干细胞的治疗有望成为根除肝癌的有效治疗方法之一。近年来中医药以其独特的辨证论治理论和“治未病”的防治特点，在控制肿瘤转移方面已凸显其优势[4]。本课题组前期研究发现中药QHF复方能抑制肝癌细胞的增殖，并能明显抑制肝癌的转移和复发[5]，但对于QHF复方抑制肝癌细胞生长的机制尚不清楚，故本实验将在细胞水平上探讨QHF复方对Huh7细胞生长、凋亡、侵袭及肝癌干细胞表面标记物的影响，以期为探讨QHF复方防治肝癌提供新的思路与方法。

1 材料与方法

1.1 主要材料

人肝癌Huh7细胞株购自中国科学院上海生命科学研究院。华蟾素注射液购自安徽金蟾生化股份有限公司；人参皂苷Rg3标准品和胰蛋白酶均购自上海源叶生物科技有限公司；香菇多糖购自南京泽朗植提技术有限公司；注射用血塞通(冻干)购自昆明制药集团股份有限公司；DMEM培养基购自美国Gibco公司；胎牛血清购自美国Sigma公司。

1.2 实验方法

1.2.1 QHF复方配制参考文献[5]，将华蟾素、人参皂苷Rg3、三七总皂苷、香菇多糖按一定的比例进行配制。……