易玉玲，雍江堰，祖瑞铃，李燕

临床难治的耐甲氧西林表皮葡萄球菌（methicillin resistant S.epidermidis，MRSE）主要耐药机制与mecA基因编码产生的新青霉素结合蛋白2a（penicillin binding protein 2a，PBP2a）有关，且具有生物膜形成能力的MRSE可能会因为生物膜内营养供给、氧浓度、渗透压等内环境的改变，导致其耐药基因被激活或发生基因水平的转移，造成耐药增强而增加临床治疗难度[1～2]。因此，研究可以抑制生物膜阳性MRSE的药物或方法十分必要。

已有研究表明中药及其活性单体成分与抗生素联用后对细菌生物膜的抑制作用增强，并且可能会逆转MRS的耐药性[3]。活血化瘀药物丹参，其有效成分丹参酮类化合物具有抗菌、抗炎作用，但目前研究其抑制生物膜的临床研究和应用较少。在本课题组前期实验中，我们发现二氢丹参酮与氨苄西林联用能协同抑制MRSE浮游菌与生物膜细菌，故本研究以MRSE耐药基因为靶点，研究药物对生物膜阳性的MRSE mecA、PBP2a表达的影响，初步探讨丹参活性单体与抗生素联用对MRSE耐药逆转的可能性，为防治生物膜阳性MRSE感染寻找新的思路。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验菌株 SE生物膜阳性参考菌株SE1457（复旦大学瞿涤教授惠赠），生物膜阳性临床菌株SE15569、SE21021、SE21306、SE26508和SE30291[4～5]：经鉴定均对苯唑西林耐药，即苯唑西林对每株菌的 MIC≥ 4 µg·mL-1，判断为MRSE。

1.1.2 主要试剂、药物及仪器 二氢丹参酮Ⅰ对照品（成都普菲德生物技术有限公司）；氨苄西林标准品（中国食品药品检定研究院）。MHB、TSB培养基（青岛海博生物科技有限公司）；细胞增殖及细胞毒性测试试剂盒XTT（南京凯基生物科技发展有限公司）；……