夏文龙， 余树培， 吴 植， 郭长明， 卢会鹏， 孙怀昌， 朱善元

(1.江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏泰州 225300；2.扬州大学兽医学院/江苏省重要动物疫病与人兽共患病协同创新中心，江苏扬州 225009)

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由PRRS病毒(PRRSV)引起的一种高度接触性传染病，以母猪繁殖障碍和仔猪及育肥猪呼吸道疾病为主要特征[1]。该病于1987年在美国和加拿大首次发现并迅速蔓延到世界各地，给全球养猪业造成了巨大经济损失[2]。2006年，我国大规模暴发以高热、高死亡率为主要特征的PRRS疫情，研究表明其主要病原为高致病性PRRSV变异株[3]，鉴于PRRSV具有复杂的感染及免疫逃避机制[4]，目前防控手段无法将其净化和根除。

PRRS主要依靠疫苗接种进行预防控制，近年来，有许多学者利用micro-RNA[5]、干扰素[6]、受体阻断[2]等新策略进行抗病毒研究，而这些研究前提是具备稳定、可靠的动物模型，以便评价其保护效果。目前，PRSSV人工感染仔猪主要是通过肌肉注射和滴鼻方式接种[7-8]，缺少接触感染的相关研究资料，为了模拟PRRSV在猪群内的自然扩散，本试验通过同居饲养方式在健康猪中引入PRRS病猪，并建立荧光定量RT-PCR方法，动态监测感染仔猪的病毒血症和排毒水平，为进一步了解PRRSV的传播机制和建立防治PRRSV感染的仔猪模型提供了参考依据。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

AxyPrep质粒DNA小提试剂盒和DNA凝胶回收试剂盒购自AXYGEN公司；rTaqDNA聚合酶、pMD-18T载体、MiniBEST Viral RNA/DNA Extraction Kit、PrimeScript RT Master Mix、SYBR Premix ExTaqⅡ为日本TaKaRa公司产品；PRRS ELISA检测试剂盒为美国IDEXX公司产品；引物由上海生工生物工程有限公司合成。……