李耀国， 孙 彤， 武文丽， 陈永志， 蒋丹尼

(海南热带海洋学院生命科学与生态学院，海南三亚 572022)

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)，是参与糖酵解等能量代谢反应中的关键酶，还具有修复DNA、调节组蛋白、促进细胞凋亡等一系列功能，是一种参与多种亚细胞水平活动的多功能蛋白质[1]。GAPDH广泛存在于众多生物体中，在细胞中含量占总蛋白质的10%～20%；种属间序列高度保守，因在同种细胞或不同组织中蛋白质表达量相对恒定而常作为管家基因[2]。其分子一般为4个相同亚基构成的四聚体，每个亚基含催化结构域和辅酶结合结构域[3]。水产动物中已有GAPDH基因的cDNA全长序列克隆及相关研究。如半滑舌鳎GAPDH基因的开放阅读框全长序列为1 002 bp，编码333个氨基酸的多肽链[4]。外因刺激可以改变GAPDH的表达水平，雌性食蚊鱼暴露在不同浓度双氯芬酸钠后肝脏GAPDH的表达量出现显著变化[5]。

DNA链上存在一种甲基化修饰，被视为基因表达的“沉默标记”，它可通过甲基基团的空间位阻效应或促使阻抑蛋白与甲基化DNA相结合而抑制基因表达[6]。去甲基化试剂5-氮杂胞苷能整合到DNA链中，抑制甲基化转移酶的活性使基因或基因组去甲基化，进而调节基因的表达[7-8]。

马氏珠母贝(Pinctadafucata)是中国南部沿海广泛分布的一种珍珠贝。目前，尚未见马氏珠母贝GAPDH基因全长cDNA序列的相关报道。本研究对马氏珠母贝GAPDH基因的全长cDNA进行了克隆及生物信息学分析，并探索了去甲基化试剂对受精卵中GAPDH基因表达水平的影响，以期为后续GAPDH的功能研究提供基础。……