刘 平，周忠良

（1.河北省唐山市乐亭县王滩镇动物卫生监督所，河北 唐山 063000；2.河北省唐山市动物疫病预防控制中心，河北 唐山 063000）

奶牛乳房炎是危害奶牛养殖业发展的主要疾病之一，其发病率高达40%以上。发病奶牛的乳腺组织发生病理变化，引起奶牛的产奶量和奶品质下降，严重时使病牛失去生产性能，甚至使牛死亡，造成巨大的经济损失。根据乳房炎及乳汁有无肉眼可见变化分为临床型乳房炎和隐性乳房炎。国内外资料显示，隐性乳房炎的发病率高于临床型。目前，抗生素治疗和疫苗免疫依然是防治奶牛乳房炎的主要方法。但是，致病菌血清型的多样性降低了疫苗保护率，高品质奶制品的需求大大限制住了抗生素的使用。中兽医药在我国有几千年的应用历史，对动物疾病的治疗，畜产品品质的改善具有极大的潜在价值。本研究将探讨含药穴位贴治疗隐性奶牛乳房炎的可行性和效果。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

绿原酸（批号E-0075，购自上海同田生物技术股份有限公司）;聚丙烯酸钠（批号S108369）、羧甲基纤维素钠（批号C104986）、阿拉伯胶(批号 A108975)、明胶（批号 G108396）、高岭土（批号 38120）、羊毛脂（批号 L116310）、甘油（批号G116203）及氮酮（批号 A104374）均购自 Aladdin。

1.2 穴位贴的制备

巴布剂基质配方为聚丙烯酸钠0.75g、阿拉伯胶7.5g、明胶7.5g、甘油19mL、羧甲基纤维素钠0.3g、水 40mL、高岭土3g、羊毛脂1g，混合均匀，分散于1/2配方量的水中，溶胀3h。同时将配方量的高岭土分散于配方量的甘油中，混合均匀。后于沸水浴中，边搅拌溶胀后的聚丙烯酸钠等混合物，边向其中加入混合了高岭土的甘油及余量的水、配方量的羊毛脂，搅拌20min。随后，以1%氮酮为促透剂，加入绿原酸，配成含药量1%的穴位贴；空白穴位贴使用同体积的无水乙醇替代绿原酸溶液。

1.3 隐性乳房炎临床病例的筛选

试验地点：河北乐亭县王滩镇奶牛场。

隐性乳房炎的确定主要靠实验室诊断而确定，如细菌学检查、血琼脂培养基厌气培养；或体细胞记数法，即每mL乳汁中体细胞数超过50万即可诊断为乳房炎症。本试验选择处于泌乳中期的荷斯坦奶牛，使用细胞计数仪来检测奶中的体细胞数来筛选符合条件的病例。符合条件的病例分为实验组和对照组，每组各10头奶牛，20个乳区（每头奶牛选2个乳区）。

1.4 病例的治疗

在符合条件的奶牛身上，选取阳明穴、滴明穴、通乳穴和后海穴4个穴位作为穴位贴的治疗部位。实验组贴敷绿原酸巴布剂，对照组贴敷空白巴布剂。每隔3d贴敷一次穴位贴；分别于第5、10、15天取乳样检测体细胞数量，同时统计对应乳区的产奶量。

1.5 数据统计分析

试验所得数据由Excel初步处理后用GraphPad prism 6.0进行显著性统计分析，结果用平均值±标准差表示。

2 试验结果

2.1 含绿原酸穴位贴对选定乳区产奶量的影响（见表1）

结果表明，在贴敷含药穴位贴后，实验组选定乳区的平均产奶量逐渐升高；然而，贴敷空白穴位贴的对照组，选定乳区的平均产奶量逐渐降低。

2.2 含绿原酸穴位贴对选定乳区奶中体细胞数量的影响

结果表明，与贴敷穴位贴前相比，对照组乳区所产的牛奶中平均体细胞维持在较高水平且略有升高；而贴敷含药穴位贴后，实验组乳区所产的牛奶中体细胞数持续降低，在贴敷15d后，奶中体细胞数显著低于对照组（图1）。

3 讨论

奶牛隐性乳房炎是奶牛的重要疾病之一，其发病率高临床型奶牛乳房炎，因无明显的临床症状被忽视，但其对奶业却造成了巨大的经济损失。隐形乳房炎可使奶牛产奶量降低10%～15%。同时，患病乳区牛奶中体细胞数增加,营养价值下降,危害人类健康。因乳房炎对泌乳部位的损害，会导致奶牛的产乳能力下降，导致奶牛的利用年限缩短。

表 1 绿原酸穴位贴对奶牛产奶量影响（kg）

图1 含药穴位贴对患病乳区牛奶中体细胞数的影响

抗生素等化学药品一直是防治奶牛乳房炎的常用方法，但化学药品的长期大量应用不仅使病原菌产生耐药性，大大降低临床治疗效果；也会使其在奶和奶制品中残留量超标，给人类健康造成很大的威胁。蒲公英治疗乳痈（乳房炎）的常用中药，绿原酸是其主要成分之一。绿原酸的性质稳定，具有临床应用广泛、定量准确、检测快捷、提取简便等优点。具有抗菌、消炎和抗病毒等作用，目前国内外研究普遍认为绿原酸具有很好的抗金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌等作用。研究发现，提取的绿原酸对流感病毒及腺病毒均具有一定的抑制作用，体外对新城疫病毒有阻断抑制或中和作用。但绿原酸的口服生物利用率非常低，静脉注射后又可能引起过敏反应。经皮给药可以绕过肝脏的首过效应以及其对胃肠道的破坏，维持比较稳定且相对持久的血药浓度，提高生物利用度，降低药物的毒副作用，所以我们考虑绿原酸的经皮给药。

穴位贴敷，通过药物作用于穴位，使药物快速的产生药理作用，从而发挥出药物效应、经穴效应的双重治疗作用，从而达到更好的治疗疾病和调整机体机能的效果。巴布剂因其大容量的载药系统、相对稳定的血药浓度、与皮肤亲和性高等优点，被世界广泛的认同为经皮给药体系新的发展方向。本实验使用巴布剂制作的含绿原酸穴位贴治疗奶牛隐性乳房炎。试验结果表明，这种方法可以使患病乳区所产牛奶量维持在一定水平（表1）；对降低患病乳区牛奶中的体细胞数具有一定的效果（图1）。可以为奶牛隐性乳房炎的临床治疗方法提供一定参考。

虽然本研究的结果能够给我们一些启发，为寻找防治奶牛隐性乳房炎的新方法提供思路。但是，在研究就过程中也发现了一些问题：（1）对穴位的准确选取是保证治疗效果的基础；（2）实验奶牛在运动和倒卧时会时贴敷的穴位贴发生脱落。因此，为使这种方法可以准确高效的运用到临床中，我们将会在后续的研究中解决上述问题。

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