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(南华大学药物药理研究所血管生物学实验室，湖南 衡阳 421001)

动脉平滑肌细胞(ASMC)在不同的动脉或相同血管床的不同部位以及血管壁的不同层次等存在表型异质性。细胞表型异质性表现为细胞形态学表型差异、平滑肌细胞特异性蛋白的表达差别和不同的生长能力。与骨骼肌和心肌细胞不同，ASMC在分化终末时仍保持高度的可塑性，并能从收缩表型向增殖、分泌的表型转变[1]，而后者主要导致血管增长和重构，是血管适应动脉粥样硬化、高血压时病理生理刺激的基本要素[2]。当血管生长在原代血清培养条件时血管肌细胞发生相似的表型调节。因此原代培养的动脉平滑肌细胞能为更大范围的在细胞和亚细胞水平为研究细胞反应机理提供有效的模型。已有相关研究对肠系膜动脉平滑肌细胞进行分离培养，如用组织块培养法[3](但分离纯化时间较长)，胰蛋白酶消化法[4]或多种酶消化法[5]，本研究采用Ⅰ型胶原酶消化分离肠系膜小动脉平滑肌细胞，为阻力血管相关疾病的研究提供可靠且充裕的细胞来源。

1 材料与方法

1.1试验动物SPF级雄性Sprague Dawley(SD) 大鼠，体重110～150 g，由南华大学实验动物学部提供。人主动脉血管平滑肌细胞株(AVSMC)购买于ATCC。

1.2主要试剂DMEM高糖培养基，胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)均为Hyclone、I型胶原酶粉末购自sigma公司；青-链霉素(双抗) 购自碧云天生物技术公司；α-肌动蛋白单克隆抗体(α-actin) 抗体购自Abcam公司；胰蛋白酶购自美国Sigma公司；DAB显色试剂盒购康购自世纪生物制剂有限公司；MTT试剂购自北京索莱宝；……