刘远志 周吉银 张祚 李和教 黄毅岚

1西南医科大学药学院（四川泸州 646000）；2陆军军医大学第二附属医院国家药物临床试验机构（重庆 400037）；3西南医科大学附属医院药学部（四川泸州 646000）

Neuritin（又名：Nrn1或CPG15）是在研究可塑性相关基因时被发现的一种神经营养因子，具有促进轴突、树突生长和皮层神经细胞的存活、抑制神经细胞凋亡、调节神经细胞回路形成等作用，对受损神经有着明显修复的功效［1-2］。目前，随着糖尿病的病患率急剧上升，在糖尿病诊断5年后其外周神经病变的发病率大于50%；且在糖尿病周围神经病变后期，患者会发生糖尿病足等严重并发症。研究表明当糖尿病发生后，骨髓神经受损情况对糖尿病周围神经病变密切相关，但是具体作用机制尚不十分清楚，需进一步研究［3］。因此，建立骨髓特异性高表达neuritin小鼠模型，可作为研究neuritin对骨髓神经损伤修复作用的良好平台，将为进一步研究骨髓神经病变与糖尿病周围神经病变提供基础。本研究使用CMV-Loxp-STOPLoxp系统高表达neuritin转基因小鼠和骨髓特异性Lyz2-Cre转基因小鼠进行繁殖、交配，筛选出骨髓特异性高表达neuritin的转基因小鼠作为动物模型，并对模型鼠进行骨髓鉴定。

1 材料与方法

1.1 实验动物委托广州赛业生物科技有限公司构建CMV-loxp-stop-loxp系统高表达neuritin（loxpstop-loxp-neuritin）转基因小鼠，骨髓特异性Lyz2-Cre小鼠购至美国杰克逊实验室。小鼠在陆军军医大学第二附属医院SPF级动物室饲养和繁殖。

1.2 主要器材与试剂器材：PCR扩增仪（美国Bio-Rad）；DYCP-31D型电泳槽（北京六一仪器厂）；恒温金属浴（杭州博日公司）；……