万仁强 林勇 肖平 龚平桂

1广东省第二人民医院耳鼻咽喉头颈外科（广州510317）；2喀什地区第一人民医院耳鼻咽喉科（新疆喀什844000）

长链非编码 RNA（long noncoding RNA，lncRNA）是一类长度大于200个核苷酸，不具有蛋白质编码功能的RNA分子。研究表明lncRNA与基因表达、胚胎发育、物质代谢等有着密切的联系，因此被称为基因组学的富矿。近年来大量研究［1-2］表明lncRNA在多种疾病中扮演了重要的角色，并且作为调节因子通过多种途径参与细胞增殖、分化、凋亡、药物抵抗、上皮间质转化等［3-6］。

变异性浆细胞瘤异位1（plasmacytoma variant translocation 1，PVT1）是最近被发现的一种特异性的lncRNA，全长1 716 bp，位于人类染色体8q24，原癌基因MYC下游，其转录产物属于基因间的lncRNA［7］。近年来研究［8-11］表明，PVT1 在多种肿瘤中高表达，例如肝癌、胃癌、结直肠癌、非小细胞肺癌等，并且与预后相关。然而，目前国内外关于PVT1在鼻咽癌中的研究还比较少，因此本研究通过检测PVT1在鼻咽癌细胞中的表达，利用siRNA干扰技术研究降低PVT1后对鼻咽癌细胞增殖、迁移侵袭的影响，为进一步研究PVT1在鼻咽癌发生发展过程中的作用机制提供初步的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株鼻咽癌细胞5-8F、C666-1、CNE-1、6-10B、CNE-2、HNE-1、HONE-1及鼻咽永生化上皮细胞NP69购自中科院上海细胞库。

1.1.2 主要试剂RNA提取试剂盒Rneasy MiNi Kit购自美国Qiagen公司；逆转录试剂盒iScript cDNA synthesis kit购自美国Bio-Rad公司；荧光定量PCR试剂盒SYBR®Premix Ex TaqTM购自TakaRa公司；Keratinocyte-SFM培养基、RPMI-1640培养基、胎牛血清、0.25%胰蛋白酶购自美国Gibco公司；LipofectamineTM2000转染试剂购自美国Invitrogen公司；噻唑蓝（MTT）购自上海碧云天公司；Traswell小室、细胞培养瓶、细胞培养板购自Corning公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养人鼻咽永生化上皮细胞NP69接种于含10%胎牛血清的新鲜Keratinocyte-SFM中培养。……