王加勇，陆紫敏，李雪晨

(同济大学附属同济医院输血科，上海 20065)

输血治疗在临床抢救危重患者的过程中发挥着不可替代的作用，正确鉴定ABO血型是保障临床输血安全的前提。临床上血液病如骨髓增生异常综合征(MDS)会导致患者ABO抗原减弱或ABO抗体效价降低，造成ABO血型鉴定正反定型不一致，给临床诊断和治疗带来困难[1]。现对1例血型鉴定困难MDS急诊患者的处理报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 患者男，51岁，因头晕乏力、夜间高热，于2017年5月30日夜间到本院急诊内科就诊。患者在外院诊断为骨髓增生异常综合征-原始细胞增多性难治性贫血(MDS-RAEB)，重度贫血貌，呼吸急促，烦躁不安，双肺呼吸音粗，左侧呼吸音减弱，双肺底可闻及湿性啰音，心腹查体无其他特殊体征，急诊血常规检查白细胞计数为3.08×109/L，中性粒细胞为0.21×109/L，血红蛋白为29 g/L，血小板计数为41×109/L，行胸部CT检查提示双肺感染并有少量胸腔积液。因患者血色素过低，夜班医生申请输注红细胞悬液400 mL。

1.2仪器与试剂 凝聚胺试剂为珠海贝索公司产品；ABO、Rh(D)血型定型检测卡、不规则抗体筛检卡均为美国伯乐公司产品；抗A抗B血型定型试剂、RhD(IgM)血型定型试剂、抗人球蛋白(抗IgG，C3d)检测试剂、人ABO血型反定型用红细胞试剂、不规则抗体检测试剂(人红细胞)均为上海血液生物有限责任公司产品；用于配制红细胞悬液的生理盐水为山东华鲁制药有限公司产品；人源抗A、人源抗B为本实验室自备；Diamed-ID定速离心机为瑞士达亚美公司生产；三用电热恒温水箱为常州翔天试验仪器厂生产；2420型离心机为日本久保田生产。

1.3检测方法

1.3.1红细胞吸收放散试验 将患者红细胞用生理盐水洗涤3次，在2支试管内加入1 mL患者洗涤红细胞，再分别向这2支试管内加入1 mL人源抗A和1 mL人源抗B，混匀置入4 ℃冰箱中1 h，每隔10 min摇动1次，使其充分吸收。离心后用4 ℃冷生理盐水洗涤2支试管内患者红细胞各10遍，保留末次洗涤上清液待用。将2支试管内末次洗涤后的患者红细胞放入56 ℃水浴中不断摇动10 min，离心获得放散液。将末次洗涤上清液和放散液分别与Al红细胞、B红细胞和O红细胞反应，做间接抗球蛋白试验，37 ℃孵育15 min，离心观测有无凝集。试验中设Al红细胞和B红细胞对照管。

1.3.2微柱凝胶法检测 ABO血型鉴定正定型用微柱凝胶法检测，采用常规试管法复检。复检时将患者红细胞用生理盐水洗涤3次，加样后分别放入37 ℃水浴箱和4 ℃冰箱孵育30 min，离心观察结果。反定型用试管法，复检时取2倍患者血浆，加样后分别放入37 ℃水浴箱和4 ℃冰箱孵育30 min，离心后结合显微镜观察结果。

1.3.3其他检测 血型不规则抗体筛查采用微柱凝胶法，交叉配血试验联合采用盐水法、凝聚胺法和微柱凝胶法；直接球蛋白试验采用试管法。试验操作步骤严格按照《全国临床检验操作规程》执行[2]。

2 结 果

2.1患者血型鉴定结果 未处理患者标本检测结果正定型为O型，反定型为B型，正反定型不符。37 ℃水浴和4 ℃冰箱30 min处理后盐水凝集试管法复检血型，正定型为O型；反定型结合显微镜观察，发现加2倍患者血浆经4 ℃冰箱30 min处理后结果为O型，正反定型一致，自身对照为阴性。见表1。

表1 患者血型鉴定结果

注：+为阳性；-为阴性；？为血型不确定；±为弱阳性

2.2患者红细胞吸收放散试验结果 患者红细胞吸收后末次洗涤上清液和放散液与Al红细胞、B红细胞及O红细胞都不凝集，结合Al红细胞和B红细胞对照管结果，表明患者红细胞上没有亚型或弱抗原检出。见表2。

表2 患者红细胞吸收放散试验结果

注：/为无数据；+为阳性；-为阴性

2.3其他检测结果 患者血型不规则抗体筛选试验阴性，直接球蛋白试验阴性。与400 mL O型红细胞交叉配血试验，主侧、次侧和自身对照在盐水、凝聚胺和抗人球蛋白3种介质中无聚集，无溶血，联合交叉配血结果相合。

3 讨 论

多种血液病可引起ABO抗体水平减弱或异常，进而干扰输血前血型鉴定[3]。ABO抗体水平减弱多见于免疫力低下的患者，由于疾病、化疗造成体内免疫系统抑制，出现严重感染的机会就会大大增加，感染也会加重免疫抑制，引起抗体水平下降[4]。但这种改变不是真正的血型改变，一旦病情缓解，减弱的血型抗体即可恢复正常表达[5]。

此例患者在ABO血型鉴定过程中，出现了正反定型不一致，再排除了人为操作和试剂因素后，发现患者血型不规则抗体筛选试验阴性，直接球蛋白试验阴性，考虑患者血型鉴定正反定型不符是红细胞或血清本身的原因。经吸收放散试验后，结果表明无亚型或弱抗原检出，进而排除患者亚型的可能性。盐水凝集试管法复检患者血型，加2倍患者血浆经4 ℃冰箱30 min处理后最终得出正确的结果，这可能与加大患者血浆量，调整了抗原抗体反应比例，经4 ℃冰箱30 min处理后，ABO血型抗体在4 ℃反应最佳有关[6]。分析其原因，是患者抗体减弱导致凝集反应降低出现了血型鉴定正反定型不符。

输血是MDS的重要治疗方法[1]，该患者是严重感染的MDS患者，需急诊抢救用血，实际工作中，笔者发给临床400 mL O型Rh阳性去白细胞、红细胞悬液，并嘱临床缓慢输注，密切观察，保证输血安全，输注过程和输注后无任何不良反应。

[1]张勇，刘剑荣，陈华良，等．1例疑难血型和疑难配血分析[J]．实验与检验医学，2015，33(3)：389-390．

[2]尚红，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程[M]．4版．北京：人民卫生出版社，2014．

[3]庄光艳，张烨，刘素芳，等．血液病对输血前检查中抗体检测的影响[J]．北京医学，2014，36(8)：685-688．

[4]王晨，钱宝华，韦燕萍，等．7例ABO血型抗体减弱或缺乏的临床分析[J]．临床输血与检验，2008，10(3)：243-244．

[5]庄光艳，闫芳，侯玉涛，等．血液病致ABO抗原减弱的血型基因定型研究[J]．北京医学，2014，36(6)：478-480．

[6]张海宇，张珂．微柱凝胶法ABO血型鉴定正反定型不相符的统计及原因探讨[J]．检验医学与临床，2012，9(11)：1295-1296．