钱金花　景　璇　魏美美　毛宇湘　

(河北省中医院脾胃病科，河北　石家庄　050011)

1河北省中医院中医内科

肝癌患者大多确诊时已处于中晚期，因此手术及介入治疗成为肝癌治疗最为常见的治疗手段，但是化疗使患者产生耐药及较强毒副作用〔1〕。目前中医认为肝癌主要发病机制为正虚邪陷，即脾气污虚，肝气郁滞，因此应当以健脾扶正，消癥散结为原则进行治疗〔2,3〕。健脾消癥方是我科在总结前人经验的基础上，结合多年的临床经验，自制的针对肝癌治疗的中药复方，且曾有研究显示以健脾消癥论治肝癌能显著诱导肝癌细胞株(H22)细胞凋亡，并抑制细胞增殖〔4〕，但具体机制报道较少。磷脂酰肌醇3 激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路是一种与细胞增殖、凋亡密切相关的信号途径，被称为“抗凋亡途径”，在肝癌等多种肿瘤中被高度激活，成为多种抗癌药物的作用靶点〔5〕。本研究旨在探讨健脾消癥方对H22肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。

1　材料与方法

1.1一般资料细胞株为小鼠肝癌细胞株H22细胞主要试剂与仪器：兔抗人细胞周期蛋白(Cyclin)D1，CyclinE，p21，p27，PI3K，AKT，p-AKT及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)多克隆抗体均购自美国Abcam公司；四甲基偶氮唑盐(MTT)，DMEM培养基均购自美国Gibco公司；Annexin V-FITC/PI流式双染试剂盒，细胞周期检测试剂盒均购自南京凯基生物技术有限公司。DYCZ-25D型双垂直电泳仪，DYCZ-25D型转印电泳仪均购自北京六一生物科技有限公司；ChemiDocTM XRS凝胶成像系统购自美国伯乐公司；FACSCalibur流式细胞仪购自美国BD公司；MK3酶标仪购自美国thermo公司。

1.2药物制备健脾消癥方由河北省中医院脾胃病二科自制。……