李黎洪　徐巧莉　陈智伟　陈　昱　吴丽婷　胡建雄

(莆田学院附属医院乳腺外科，福建　莆田　351100)

1莆田学院附属医院综合病房2莆田学院附属医院病理科

3莆田学院附属医院重症监护室

据报道，乳腺癌发病率和死亡率逐年上升，发病率约为女性恶性肿瘤的29%〔1〕，年龄的增加、酗酒、吸烟、肥胖等均可导致乳腺癌的发生。目前，乳腺癌的诊断和治疗方法取得了一系列的发展，但其五年生存率仍较低〔1～3〕。乳腺癌的发病机制并不完全清楚。研究表明，乳腺癌的发生、发展受多种细胞因子、分子信号通路的影响〔4〕。经典Wnt信号通路调控基因转录、细胞增殖、分化等，对癌症的发生、发展过程起重要作用。Wnt1是一类Wnt基因的总称，对结构相似的分泌性信号转导蛋白具有编码作用。既往研究表明，大部分Wnt基因在乳腺癌组织中的表达量增加，促进下游靶基因的表达，参与乳腺癌的发生、发展〔5〕。本研究通过小RNA特异性调节Wnt1基因表达，研究下调Wnt1基因水平对乳腺癌细胞侵袭、迁移的影响及对Wnt1/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。

1　材料与方法

1.1主要试剂及仪器人乳腺癌细胞系MCF-7购自美国模式菌种收集中心(ATCC)，杜尔伯科极限必需培养基(DMEM)培养基 、胎牛血清购自美国Sigma公司，Matrigel基质胶购自美国BD公司，Transwell小室购自美国Corning公司，Wnt1抗体、β-catenin抗体、细胞周期素(cyclin)-D1购自美国Abcam公司，β-肌动蛋白(actin)抗体、辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗兔二抗购自南京碧云天生物科技有限公司，恒温培养箱购自日本SANYO公司，台式高速(低温)离心机、凝胶成像仪购自美国ThermoFisher Scientific公司。……