循环纤维细胞在慢性哮喘模型小鼠气道重塑中的作用
2018-04-17任冬花冯喜英李西玲
任冬花 关 巍 冯喜英 李西玲 赵 立
(西宁市第二人民医院呼吸科,青海 西宁 810003)
1青海大学附属医院呼吸科
2中国医科大学附属盛京医院第一呼吸与重症监护内科病房
哮喘以气道高反应性、可逆性气流受限和慢性气道炎症为特点〔1〕循环纤维细胞随着其来源、表型转化的特点和在组织损伤修复过程中的作用得到认可,学者们对其研究越来越多〔2~4〕。本文探讨循环纤维细胞在哮喘气道重塑中的作用。
1 材料与方法
1.1材料SPF级健康雌性BALB/c 小鼠30 只,6 周龄,体重(20±3)g,由中国医科大学实验动物中心提供(合格证编号4200592945)。将其随机编号并分为:对照组、哮喘组和氯化钆清空组,每组10只。室内温度18℃~25℃,湿度45%~55%,饲料和应用水均经充分消毒,保证充足食物和水分供应。每日观察小鼠生存状态,及时更换敷料和鼠笼,保证其生存环境卫生。卵原蛋白(OVA)、氯化钆、戊巴比妥钠:美国Sigma 公司;氢氧化铝:上海金赛医药化工有限公司;大鼠抗小鼠CD45 单克隆抗体:美国Biolegend 公司;免疫酶标双标试剂盒购:福州迈新生物技术开发有限公司;多聚赖氨酸:金赛医药化工有限公司;兔抗小鼠Ⅰ型胶原单克隆抗体、兔抗小鼠α-平滑肌肌动蛋白(SMA)单克隆抗体:武汉博士德生物工程有限公司;其余试剂均为国产分析纯。
1.2实验方法第1、8、15天哮喘组和氯化钆清空组小鼠腹腔内注射氢氧化铝(2 mg)和OVA(20 μg)混悬液,对照组以等量磷酸盐缓冲液(PBS)代替。第21天开始,哮喘组和氯化钆清空组给予50 mg/kg 戊巴比妥麻醉后,经滴鼻吸入0.2%OVA激发小鼠,50 μl/只,每周3次,持续至第52天,共计13次,对照组等量PBS 等时间间隔滴鼻吸入。……
