赵胜，刘永飞，廉政，刘燕霏，通信作者，张大伟，通信作者



L-苯丙氨酸调控启动子强度的研究

赵胜1，刘永飞2，廉政2，刘燕霏1，通信作者，张大伟2，通信作者

（1. 天津农学院 动物科学与动物医学学院，天津 300384；2. 中国科学院 天津工业生物技术研究所，天津 300380）

TyrR是大肠埃希氏菌（简称）芳香族氨基酸生物合成和运输途径中的一种全局性调控蛋白，控制着包括在内的8个转录单元的转录。将基因启动子的两个RNAP（RNA聚合酶）结合位点进行定点突变来影响TyrR对的介导活化，并且TyrR与L-苯丙氨酸（L-Phe）结合极大地增强了RNAP对下游结合位点（启动子）的结合亲和力，因此可用L-Phe来调控启动子强度进而调控转录水平。本文以构建L-Phe高产菌株为最终目的，对启动子进行突变并用以构建L-Phe生物传感器，使启动子强度转变为可测量的荧光值，再使用L-Phe调控该传感器，影响启动子强度。最终发现突变后的启动子强度发生不同程度的改变，并且用L-Phe调控后，在一定浓度范围内，随着L-Phe浓度的升高启动子强度也在一定范围内增强。这将有利于筛选出受调控的优质启动子，并为改造代谢路径及高产L-Phe菌株构建有重要意义。

TyrR；；L-Phe；生物传感器；启动子强度

L-Phe属于芳香族氨基酸，是人体内必需的八大氨基酸之一，在日常生活中用途广泛[1]。其生产方法主要有酶法和微生物发酵法，后者因其具有原料廉价易得、环境污染小、产物纯度高等特点在工业生产中广泛运用[2]。现今，微生物发酵法主要是大肠杆菌高产菌株的工业发酵，高产菌株可以通过分子操作获得。……