潮　蓉，武小娟，王羽辉，苏倩倩 ，吕雄文

(1. 安徽医科大学药学院，安徽 合肥　230032；2. 安徽省胸科医院药剂科，安徽 合肥　230022)

酒精性肝病(alcoholic liver disease, ALD)是由于长期、大量饮酒引起的肝脏的损害，其发展过程为酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝硬化。目前，我国ALD的发病率逐渐增加，已成为仅次于病毒性肝炎的第二大病因[1]。因此，治疗酒精性肝损伤受到日益广泛的关注。

嘌呤受体 P2X7(purinergic 2X7 receptor, P2X7R)是一种离子型配体门控通道受体，由配体ATP激活后，可使离子通道开放，促进Ca2+、Na+内流以及K+外流，进而介导一系列细胞信号转导，如可激活核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NACHT-LRR-PYD-containing proteins 3 inflammasome, NLRP3)，核转录因子-κB(nuclear transcription factor kappa B, NF-κB)、转化生长因子β(transforming growth factor β, TGF-β)等多条通路，诱导成熟白细胞介素1β(interleukin 1β, IL-1β)、白细胞介素18(interleukin 18, IL-18)等细胞因子的成熟和释放[2]，在炎症反应和免疫调节中起着非常重要作用。研究表明，ATP-P2X7R是激活NLRP3的一条重要信号通路，NLRP3炎性体的活化主要通过分泌IL-1β、IL-18发挥下游效应[3]。已有报道，IL-1β促进慢性肝损伤[4]，IL-18也被发现参与肝细胞的损伤[5]，由此推测，P2X7R可能通过激活NLRP3引起肝细胞损伤。为了探讨P2X7受体及其介导的NLRP3炎性体信号通路在酒精诱导的肝损伤中的作用，本实验应用C57BL/6小鼠制备急性酒精肝模型，通过使用P2X7特异性阻断剂A438079干预模型动物，观察抑制P2X7R对肝损伤的影响，并探讨P2X7R-NLRP3信号通路在酒精性肝损伤中的作用。

1　材料与方法

1.1　材料

1.1.1实验动物8～10周龄C57BL/6小鼠，♂，体质量(23±3)g，由安徽医科大学实验动物中心提供。小鼠的饲养环境为SPF级动物房，室温(18～23) ℃，湿度为40%～60%，每笼2只。

1.1.2试剂P2X7抗体(美国Santa Cruz公司)，A438079(美国TOCRIS公司)，NLRP3抗体、ASC抗体、IL-1β、IL-18(北京博奥森公司)，ECL化学发光试剂盒(美国Thermo公司)。……