郭正富，杨小琴，李　军

（1.宜宾职业技术学院,四川宜宾 644003；2.高县水务局,四川高县 645154）

高粱作为饲料在欧美国家较为广泛，其具有替代玉米的潜能。但由于国内种植的高粱多为褐高粱，其单宁含量在1%～2%，适口性差，限制了其在饲料中的应用（唐茂妍和陈旭东，2013）。前人研究表明，低单宁含量的高粱作为饲料原料对猪和鸡生长的影响与玉米相当（李玉清和邹丽娟，2009；Duodu等，2005），而高单宁含量的高粱对肉鸡的生长具有负面作用，单宁也是影响高粱能量利用率的主要抗营养因子（Pan等，2016；Pour-Reza和 Edriss，1997）。此外，高粱中另外一种抗营养因子为醇溶蛋白，其缺乏必需氨基酸，因此会降低氨基酸的消化率（Selle等，2003）。有研究表明，日粮添加外源性蛋白酶能提高肉鸡生长性能和养分利用率（Barekatain等，2013；Liu等，2013）。目前，关于高粱型日粮中蛋白酶的应用研究较少，因此，本研究以AA商品肉鸡为试验动物，研究高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对1～42日龄肉鸡生长性能、养分利用率、空肠形态和肉质的影响，为高粱在肉鸡上的应用提供理论依据。

1　材料与方法

1.1试验材料试验用蛋白酶购自溢多利生物股份有限公司。

1.2试验动物与日粮设计选取健康、体重一致的1日龄雌性AA商品代肉仔鸡864只，采用完全随机设计分为4个组，每组6个重复，每个重复36羽。试验日粮参考NRC（1994）肉鸡饲养标准和《中国鸡饲养标准2004》配制，处理1组饲喂玉米-豆粕型日粮，处理2组饲喂玉米-豆粕型日粮+200 mg/kg蛋白酶，处理3组饲喂高粱-豆粕型日粮，处理4组饲喂高粱-豆粕型日粮+200 mg/kg蛋白酶。肉鸡分两阶段饲养，1～21日龄和22～42日龄基础日粮组成及营养水平见表1。

1.3饲养管理鸡只采用分层笼养，舍内采用红外灯加温，鸡舍第1周温度控制在32～35℃，第2周控制在30℃，之后每周将温度下调2℃，直至温度控制在22℃，舍内相对湿度控制在60%～65%，光照采用自然光照和人工光照结合。试验鸡只全期自有采食、饮水，每天清粪一次，按照商品肉鸡常规程序进行免疫和消毒。饲养试验时间为6周。

表1　1～21日龄和22～42日龄肉鸡基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.4测定指标

1.4.1生长性能的测定每天观察鸡群的健康、采食、粪便状况和鸡只死淘数，计算鸡只试验全期死亡率。试验期间每周按重复记录采食量，分别在试验当天、22、43 d清晨对试验鸡只按重复进行称重，记录期末体重，计算各重复鸡只在1～21日龄和22～42日龄平均日采食量、平均日增重和料重比。

1.4.2养分利用率的测定在试验第19和40d清除料槽所有残余饲料，每个重复选取10只鸡进行养分利用率测定。准确记录肉鸡3 d内采食量，收集各重复鸡只粪便，-20℃保存，样品用于分析干物质，总能及氮含量。

干物质利用率/%=（干物质摄入量-干物质排泄量）/干物质摄入量×100；

总能利用率/%=（总能摄入量-总能排泄量）/总能摄入量×100；

表观代谢能=日粮总能×总能利用率，氮利用率/%=（氮摄入量-氮排泄量）/氮摄入量×100。

1.4.3空肠绒毛形态在试验第22天、第43天清晨各重复随机选择8只鸡进行屠宰，在43 d清晨饲喂前（42日龄晚供水禁食），各重复随机选取8只鸡进行屠宰，采集空肠中段2～3 cm以及左侧盲肠（两端结扎），-80℃保存。将2 cm空肠肠段样本用中性缓冲液冲洗干净后，固定在10%福尔马林溶液，样本经过脱水、透明、包埋（石蜡）后进行HE染色，显微镜下（40×）观察并测量绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度/隐窝深度。

1.4.4肌肉品质的测定收集肉鸡胸肌，肌肉颜色（亮度、红度和黄度值）采用色度计测定（CR-410，柯尼卡美达能，日本）。pH和滴水损失的测定参考Straadt等（2007）的研究方法。

1.5数据统计与分析试验数据采用SPSS（19.0版）单因子方差分析进行分析，各组均值采用Tukey氏多重比较进行差异显著性检验，以P＜0.05作为差异显著的标准。

2　结果与分析

2.1高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对肉鸡生长性能的影响由表2可知，不同日粮类型（玉米或高粱）对肉鸡生长前期（1～21日龄）、生长后期（22～42日龄）及全期（1～42日龄）生长性能无显著影响（P＞0.05）。与未添加蛋白酶组相比，添加蛋白酶组22～42日龄平均日增重显著提高5.87%，1～42日龄显著提高5.09%（P＜0.05），日粮类型、日粮添加蛋白酶对试验期间肉鸡死亡率并无显著影响（P＞0.05）。日粮不同能量来源的饲料原料和蛋白酶对肉鸡生长性能的影响无显著交互效应（P＞0.05）。

表2　高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对1～42日龄AA肉鸡生长性能的影响

2.2高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对肉鸡养分利用率的影响由表3可知，日粮添加蛋白酶19～21日龄、22～42日龄肉鸡干物质利用率分别显著提高3.00%和2.08%，对总能的利用率显著提高2.34%和2.15%，对氮的利用率显著提高2.84%和5.48%，表观代谢能分别显著增加2.33%和2.16%。（P＜0.05）。与玉米型日粮相比，肉鸡饲喂高粱型日粮有降低表观代谢能，总能和氮利用率的趋势（P=0.08）。日粮类型对肉鸡养分利用率无显著影响（P＞0.05）。日粮类型和蛋白酶对肉鸡养分利用率的影响无显著的交互效应（P＞ 0.05）。

表3　高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对1～42日龄AA肉鸡养分利用率的影响

2.3高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对肉鸡空肠形态的影响由表4可知，与非蛋白酶组相比，添加蛋白酶21日龄肉鸡绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比显著提高4.26%和20%（P＜0.05），隐窝深度显著降低11.11%（P＜0.05），42日龄肉鸡绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比显著提高2.17%和14.29%（P＜0.05），隐窝深度显著降低5.56%。（P＜0.05）。日粮类型对空肠形态无显著影响（P＞0.05），日粮类型与蛋白酶对空肠形态的影响无显著交互效应（P＞0.05）。

2.4高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对肉鸡胸肌品质的影响由表5可知，能量原料来源对鸡肉品质无显著影响（P＞0.05）。与非蛋白酶组相比，日粮中添加蛋白酶屠体重量、胸肌重量显著提高4.44%和6.60%（P＜0.05），滴水损失显著下降15.74%（P＜0.05）。日粮类型和蛋白酶对肉鸡胸肌品质的影响无显著的交互作用（P＞0.05）。

表4　高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对1～42日龄AA肉鸡空肠形态的影响

表5　高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对1～42日龄AA肉鸡胸肌品质的影响

3　讨论

3.1高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对1～42日龄肉鸡生长性能的影响本研究探讨高粱替代玉米添加蛋白酶对肉鸡生长性能、养分利用率、空肠形态及肉质的影响，结果发现，各处理间对上述指标的影响并不显著。Pour-Reza和Edriss（1997）研究发现，日粮添加高粱后，单宁水平不超过2.6 g/kg时对肉鸡生长性能无显著影响。Torres等（2013）研究结果显示，日粮添加低单宁高粱替代玉米对肉鸡生长性能和肉质影响不显著，本研究结果与前人研究结果一致，说明在本试验中，1～42日龄肉鸡日粮中高粱可以完全替代玉米。有研究表明，玉米-豆粕型、小麦-豆粕型日粮中添加蛋白酶可以提高单胃动物的生长性能和养分利用率（Cowieson和 Adeola，2005；Café 等，2002）。本试验结果发现，在高粱-豆粕型或玉米-豆粕型日粮中添加蛋白酶可以提高肉鸡生长性能，这可能与日粮添加蛋白酶后提高了养分利用率有关。

3.2高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对1～42日龄肉鸡养分利用率的影响与玉米-豆粕型日粮相比，高粱-豆粕型日粮降低了肉鸡表观代谢能，总能和氮的利用率，这可能与高粱含醇溶蛋白有关，其固有的疏水性和二硫化物存在交联性；此外，与高粱中植酸水平较高以及植酸酶活性低有关（Liu等，2013）。高粱中总磷含量为2.92 g/kg，其中82.7%的磷为植酸磷，而高粱中植酸酶的活性显著低于小麦和大麦（Selle等，2010）。肉鸡生长早期，组织器官发育较快，但内源性酶分泌较少，这可能导致总能和氮的利用率降低（Kaczmarek等，2014）。Yu等（2016）研究发现，添加外源型蛋白酶能提高断奶仔猪蛋白质和氨基酸的消化率，包被蛋白酶在胃和小肠中的存留率分别是90%、85%，蛋白酶包被后可以降低其活力损失，由此可以增加养分的利用率，这与本试验日粮添加包被蛋白酶的研究结果一致。

3.3高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对1～42日龄肉鸡空肠形态的影响本研究结果显示，高粱型或玉米型日粮对肉鸡空肠形态影响并不显著。肉鸡生长早期，绒毛高度越长，肠道吸收面积则越大，而隐窝深度越低说明肠道组织的发育和周转需求较低（Khodambashi Emami等，2012）。日粮添加蛋白酶提高肉鸡空肠绒毛长度和降低隐窝深度，这与养分利用率的结果一致。

3.4高粱替代玉米日粮添加蛋白酶对1～42日龄肉鸡胸肌品质的影响本研究结果发现，日粮添加蛋白酶显著提高肉鸡胸肌的重量，这与日粮添加蛋白酶提高肉鸡日增重的结果一致。胸肌肌肉纤维主要由Ⅱ型纤维构成，其产生的能量由糖原的无氧酵解提供（Wang等，2015）。Solomon等（1998）报道猪肉含较多的Ⅱ型纤维，由于其含较多的糖原，参与厌氧酵解，可提高猪肉的柔性、渗出性和保持低pH。本研究发现，日粮添加蛋白酶可以降低胸肌的滴水损失和pH，这可能与添加蛋白酶后改变了肌纤维类型有关，但具体机制还需进一步研究。

4　结论

玉米或高粱型日粮添加蛋白酶可以提高22～42日龄和1～42日龄AA肉鸡日增重，改善1～21日龄AA肉鸡表观代谢能，干物质、总能和氮的利用率，提高肉鸡屠体、胸肌重量，降低胸肌滴水损失。低单宁水平高粱日粮对肉鸡生长性能的影响与玉米型日粮一致。

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