韩立强，孙　宇，付　彤，廉红霞，高腾云

(河南农业大学牧医工程学院/农业部动物生化与营养重点实验室，郑州 450002)

固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控细胞内胆固醇和甘油三酯合成，维持脂肪稳态的主要调控因子[1-2]。固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SREBP cleavage activating protein，SCAP)是SREBP的结合蛋白。哺乳动物SCAP蛋白一般由跨膜螺旋(TM)和羧基(C)末端组成，其中SCAP的TM构成了一个固醇敏感结构域，C末端结构域与SREBP前体在内质网膜形成复合物[3-4]。在细胞内胆固醇减少后，SREBP-SCAP复合物从内质网转移到高尔基体，随后SREBP前体蛋白的N末端发生蛋白酶水解，生成的SREBP片段进入细胞核调控靶基因转录，而SREBP前体蛋白的C末端通过未知机制从SCAP中移除，SCAP蛋白再从高尔基体回到内质网，然后与新合成的SREBP前体蛋白循环结合[5]。

已经有多个研究发现，SCAP-SREBP是调控固醇和脂肪代谢的关键信号通路[6]，介导了细胞内cAMP等多种分子对机体脂肪代谢的调节[7-8]。对反刍动物的研究发现，奶牛乳腺作为分泌乳脂的主要器官，胰岛素及一些信号分子能够调控乳腺上皮细胞的SREBP基因表达[9-10]。本实验室前期通过构建奶牛SREBP表达载体及硬脂酰辅酶A 去饱和酶基因(SCD)启动子载体发现，在奶牛乳腺上皮细胞中SREBP1可以促进SCD基因的转录[11-12]，但在SCAP作用下对SREBP1调控SCD基因转录的影响还不清楚。

本研究通过在奶牛乳腺上皮细胞转染SCD启动子载体，共转染SCAP和SREBP1真核表达载体，分析对SCD启动子活性及其基因表达的影响，为阐明奶牛乳腺细胞中SCAP-SREBP1通路对于脂肪代谢基因的转录调控机制打下基础。……