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猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30株CHsx1401感染性克隆的构建

2018-04-04宋江伟盖新娜杨汉春

畜牧兽医学报 2018年3期

卞 婷,周 磊,宋江伟,盖新娜,郭 鑫,韩 军,杨汉春

(中国农业大学动物医学院农业部动物流行病学重点实验室,北京 100193)

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是影响全球养猪业的一种重要病原[1-2]。PRRSV为有囊膜的单股正链RNA病毒,归类于套式病毒目、动脉炎病毒科、动脉炎病毒属[3]。国际病毒分类委员会(ICTV)最新的分类显示,动脉炎病毒科有5个属,PRRSV归类于猪动脉炎病毒属(Porartevirus)(https://talk.ictvonline.org/ictv-reports/ictv_online_report/)。PRRSV基因组全长约15 kb[4-5],至少包含有12个开放阅读框(opening reading frames, ORFs)[6-7]。基于基因组序列及抗原特性的差异,PRRSV被分为两大基因型,即欧洲型(基因1型)和北美洲型(基因2型)[8-10],两大基因型毒株间核苷酸相似性仅为60%左右[11-12]。迄今为止,PRRSV感染及其造成的疫情仍未得到很好的控制,仍然在许多国家流行,尤其是变异或新毒株的出现经常导致疫病的暴发和再流行[13-16]。

自20世纪90年代中期PRRSV在我国被确认以来,已成为严重影响我国养猪业的主要病原之一[17],尤其是2006年出现的高致病性PRRSV(HP-PRRSV)的广泛流行给我国养猪业造成了巨大的经济损失[15, 17]。近年来,基因2型PRRSV的类NADC30毒株在我国出现[18-19],并造成许多地区猪场PRRS疫情的暴发[19-21]。该类毒株的非结构蛋白2(Nsp2)编码区存在与2008年美国分离株NADC30相同的缺失模式[22],并且已有文献报道该类毒株与国内高致病性毒株存在基因重组现象[23]。作为影响中国养猪业的一类新的PRRSV毒株,研究其致病机制为临床疫情的控制提供依据显得尤为重要,而反向遗传操作技术是研究PRRSV变异与演化及分子致病机制的一个重要工具。因此,本研究旨在构建本实验室于2014年分离获得的类NADC30毒株CHsx1401的感染性克隆,以期为深入研究该类毒株的变异与演化以及与其他毒株致病性差异的分子机制奠定基础。……

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