捻转血矛线虫脂肪酶基因表达与生物学特性分析
2018-04-04周丽娜胡孟娟李祥瑞徐立新宋小凯严若峰
畜牧兽医学报 2018年3期
关键词:融合
周丽娜,胡孟娟,孙 伟,李祥瑞,徐立新,宋小凯,严若峰
(南京农业大学动物医学院,南京 210095)
捻转血矛线虫(Haemonchuscontortus)为毛圆科血矛属线虫,是反刍兽常见的胃肠道寄生性线虫,该寄生虫长期寄生于反刍动物皱胃黏膜,吸食宿主血液[1],造成感染动物胃肠组织受到严重破坏,患畜表现严重贫血、衰弱,甚至死亡[2],这给我国畜牧业发展带来很大经济损失[3-4]。
目前,对该病的防控仍停留在化药驱杀阶段,然而,耐药性虫株的产生已严重影响药物效力[5],这迫使人们尝试探究免疫学方法防治该病,因此,发掘新的具有强免疫原性或发育调节作用的潜在靶标是发展更有效防治该病方法的前提。
本实验室孙伟博士[6]和其他研究者[7]的报道显示,捻转血矛线虫脂肪酶(Lipase)是一类催化合成和分解长链脂肪酸酯的酶,与捻转血矛线虫发育调节相关,且其前18个氨基酸是信号肽区域,这预示Lipase为分泌型蛋白。据报道,一些分泌型蛋白酶、脂肪酶和C类凝集素同系物与捻转血矛线虫感染和调节宿主免疫应答密切相关[8]。本文对脂肪酶进行了克隆表达及相关生物学特性研究,以期为捻转血矛线虫病的防治提供新靶标。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1试验动物和虫体健康山羊,购自南京某山羊养殖场;雌性标重清洁大鼠,购自扬州大学实验动物中心;捻转血矛线虫三期幼虫由本实验室保存。山羊经人工感染捻转血矛线虫第三期幼虫,21 d后收集粪便,一方面进行孵化得到新的三期幼虫,另一方面利用食盐水密度梯度法收集虫卵,感染35 d后剖杀,从其皱胃挑取并收集成虫。……
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