蒋 炜，邓治林，李福昌

(四川省简阳市中医医院外科 641400)

肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)，也称肝贮脂细胞(fat-storing cell，FSC)，主要分布于肝窦周隙。目前认为，FSC可以合成和分泌胶原蛋白及产生细胞外基质，在肝纤维化、肝硬化发展过程中起着主要作用[1-3]。槲皮素(quercetin)属黄酮类化合物，存在于许多植物的花、叶、果实中，如洋葱、苹果、绿茶、芦丁、连翘及抗肝病植物药赶黄草等植物中含量较高。目前认为，槲皮素具有较好的祛痰、止咳、平喘、抗肿瘤等作用[4-5]。本研究通过用体外培养人HSC的方法为基础，用槲皮素进行干扰，检测槲皮素对HSC细胞周期的影响，以及对其Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响，分析HSC参与肝纤维化的机制及槲皮素的意义，为星状细胞的功能调控、调控机制的研究，及肝纤维化、肝硬化的防治研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1细胞来源及主要试剂 人HSC株：广州市十环医药科技有限公司；槲皮素：美国Sigma公司，批号PHR1488，相对分子质量302.24；量子点标记试剂盒：武汉珈源量子点技术开发有限责任公司；免疫组织化学试剂盒：北京博奥森生物技术有限公司；BX51荧光显微镜：日本奥林巴斯(Olympus)公司；Leica-DM6000光学显微镜Leica-DFC295系统：徕卡(Leica)仪器(德国)有限公司；BD FACSCalibur流式细胞仪：美国BD公司。

1.2方法

1.2.1细胞培养及分组干扰 将购买的细胞株(广州市十环医药科技有限公司)复苏，制成细胞悬液，细胞浓度约1.0×108/L，接种于24孔培养板(铺垫圆形盖玻片)。培养条件为：37 ℃、10%小牛血清、DMEM培养基、5% CO2。取培养第4天作后续实验。培养细胞分为对照组和实验组。槲皮素以二甲基亚砜为溶剂溶解稀释，分别给予0 μmol/L(对照组)、50 μmol/L(50-实验组)、100 μmol/L(100-实验组)、500 μmol/L(500-实验组)干扰，48 h后终止干扰。……