陈贤明，张 森，王爱民，王子明

(陆军军医大学大坪医院野战外科研究所骨科，重庆 400042)

骨肉瘤是儿童和青年人群中最常见的原发性骨肿瘤，占原发性骨肿瘤的20%[1-2]。遗传学的改变与骨肉瘤的发生发展有着紧密的联系，因此寻找一个重要的基因治疗靶标成为了人们关注的重点。微小RNA(miRNA)是一类小非编码RNA分子，大量的研究已经证实miRNA参与了多种生物学进程，包括细胞增殖、分化、凋亡等[3-4]。近年有研究发现，miR-650在包括胃癌、肝癌、肺腺癌等多种肿瘤组织中都有着高表达，并且参与了细胞的异常增殖[5-9]，提示其可能是一种潜在的促癌因子。本研究用实时荧光定量PCR的方法检测了骨肉瘤患者组织及人骨肉瘤细胞系中miR-650的表达情况，同时检测在抑制miR-650后人骨肉瘤细胞增殖情况的变化并探讨可能的机制。

1 材料与方法

1.1主要材料 骨肉瘤组织及癌旁正常组织收自本科室治疗患者，共计4例：1号病例为男性，19岁，发病于右侧股骨远端，大小约7 cm×9 cm，ⅠB期，为软骨母细胞型骨肉瘤；2号病例为男性，17岁，发病于左侧股骨远端，大小约2 cm×2 cm，ⅠA期，为骨母细胞型骨肉瘤；3号病例为女性，14岁，发病于左腓骨小头，大小约3 cm×5 cm，ⅡA期，为骨母细胞型骨肉瘤；4号病例为女性，21岁，发病于右侧股骨远端，大小约3 cm×6 cm，ⅠB期，为纤维母细胞型骨肉瘤。样本搜集在经医院伦理委员会审查通过，患者签署知情同意书后进行。人骨肉瘤细胞系MG63及健康人成骨细胞系hFOB1.19购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库，RPMI 1640培养基(Gibico,美国)、转染用培养基……