张敬霞，曲 芬

侵袭性真菌感染是重症监护和器官移植患者死亡的高风险因素[1]，其早期诊治对提高救治率至关重要。其中，丝状真菌是侵袭性真菌感染的主要病原菌之一，但丝状真菌生长缓慢（一般需要5～7 d）限制了早期诊断[2-3]，丝状真菌的早期鉴定与耐药性增强已成为临床救治的重大难题[4]。目前，丝状真菌常用的鉴定方法为镜检和菌落形态联合鉴定，但不足之处是易受检验人员主观判断影响。分子生物学方法虽是“金标准”，但其操作繁琐且对实验室条件和操作人员的技术水平要求较高，不适合常规开展[2]。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser-desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）技术可以通过检测真菌中固有的特异性蛋白形成的特征性图谱从而实现对真菌菌种快速、准确的鉴定[5-7]，对于指导临床抗生素使用非常重要[3]。本文从技术原理、标本前处理、鉴定效果及影响因素等方面对MALDITOF MS技术鉴定丝状真菌的研究进展作一综述。

1 MALDI-TOF MS技术的鉴定原理

MALDI-TOF MS技术是近几年发展起来的，用于临床分离病原菌全细胞鉴定的软电离技术，其主要是针对菌种特异性核糖体蛋白进行检测，具有操作简单、快速、准确等优点。MALDI-TOF MS主要由MALDI和TOF两部分组成。MALDI技术的工作原理：激光照射样品蛋白与过饱和的基质溶液形成的共结晶薄膜，基质从激光中吸收能量并与样品蛋白解吸附使样品电离，而电离过程中将质子转移到生物分子或从生物分子得到质子，从而使生物分子电离。TOF的工作原理：不同质荷比（m/z）的离子在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的时间不同，获得细菌特异的质谱指纹峰图。……