李 燕 王卫民 曹 萌 翟倩倩

河南新乡医学院第一附属医院内分泌科 (河南 新乡， 453100)

肝癌是一种常见的消化道肿瘤，具有恶性程度高、发病率高、转移早、预后差等特点，严重危害着人类健康，目前尚无有效的治疗方法[1]。胰岛素是一种多功能的蛋白质激素，具有刺激DNA合成、蛋白质合成和细胞生长的作用，其生理作用的发挥与肝脏、脂肪组织和骨骼肌等靶器官密不可分，中间任何环节缺陷均可导致胰岛素抵抗的发生[2]。近些年的研究显示，胰岛素抵抗与肝癌、胰腺癌等肿瘤具有密切联系[3，4]。而高胰岛素不仅可促进恶性肿瘤的生长和演进，且使患者预后差和死亡率增高[5]。胰岛素对肝癌细胞的生物学特性影响还未清楚。与肝细胞相关的胰岛素信号途径主要包括MAPK途径和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)途径[6]。鉴于此，本研究以不同浓度的胰岛素处理人肝癌细胞系HepG2，检测细胞的增殖、侵袭、凋亡情况，并探讨其对PI3K途径的影响。

1 材料与方法

1.1 细胞株 人肝癌细胞系HepG2购自ATCC(美国菌种保藏中心)细胞库。

1.2 主要试剂和仪器 甘精胰岛素注射液购自北京赛诺菲安万特制药有限公司；CCK8试剂盒购自美国Promega公司；二喹啉甲酸(BCA)试剂盒购自Thermo公司；膜联蛋白V-FITC(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)细胞凋亡试剂盒购自碧云天生物技术研究所；活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、PI3K、磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶(pAKT)抗体均购自美国Abcam公司；辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG购自北京中杉金桥公司；……