袁雪梅，姚嘉赟，郝贵杰，蔺凌云，徐 洋，潘晓艺，尹文林，沈锦玉

（农业部淡水渔业健康养殖重点实验室，浙江省鱼类健康与营养重点实验室，浙江省淡水水产研究所，浙江湖州 313001）

草鱼（Ctenopharyngodon idella）是我国的主要淡水养殖品种。然而各种疾病的暴发严重阻碍了草鱼养殖业的发展，如出血性疾病、细菌性肠炎和细菌性败血症，给草鱼养殖户造成了巨大经济损失[1-2]。草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus，GCRV）是我国第1株分离鉴定的鱼类病毒，也是水生呼肠孤病毒属中致病力最强的毒株[3-4]。由其引起的草鱼出血病是草鱼养殖过程中的最大病害，死亡率高达60% 以上，严重影响了草鱼养殖业的健康发展[5]。因其危害性大、流行范围广、发病季节长，使该病一直为我国鱼类病毒病的研究重点[4，6]。学者们就该病毒的流行病学、生物化学及分子生物学等进行了研究[7-8]。然而国际上对GCRV的研究与哺乳动物及禽呼肠孤病毒相比还有很大差距。研究病毒在体内的复制增殖规律可进一步揭示GCRV分子致病机理，从而为该病防治奠定基础。目前对于该病尚无有效治疗方法，主要依靠疫苗预防。我国从20世纪70年代开始研究草鱼出血病疫苗，研制出的组织疫苗和细胞疫苗在生产上收到了较好效果[9]。目前在疫苗生产过程中多使用细胞来增殖病毒。GCRV在细胞上繁殖速度较快，一般培养2～3 d即可观察到细胞病变（Cytopathological effect，CPE）[10]。当前多使用CIK细胞来制备细胞疫苗，在病毒培养过程中多通过观察细胞病变来收获病毒。但这种方式并不能准确反映病毒在细胞中的增殖规律，往往错过最佳收获病毒时期，致使疫苗免疫效果不理想而造成经济损失。……