张志妮，郭中敏，严 楚

（1. 中山大学，广东广州 510006；2. 广州市白云区动物卫生监督所钟落潭镇分所，广东广州 510550）

小鼠肝炎病毒（（Mouse hepatitis virus，MHV）是一种高传染性，可造成小鼠肝炎并在小鼠群中剧烈暴发并遍及全球的病毒[1]，属日冕冠状病毒科冠状病毒属，有囊膜，线性不分段的单股正链RNA病毒[1-2]，主要经过空气和接触传播。在自然界中，小鼠是其唯一易感动物。该病毒多数情况下引起亚临床感染或慢性感染，应激或机体抵抗力下降时可引起急性发病和死亡，是对实验小鼠危害最为严重的病毒之一[2]。我国国家标准《实验动物 小鼠肝炎病毒检测方法》（GB/T 14926.22—2001）规定的检测方法有酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immune-sorbent assay，ELISA）、间接免疫荧光抗体试验（Immunofluorescence assay，IFA）和免疫酶试验（Immunoenzyme assay，IEA）。如ELISA检测为阳性的样品，经IFA检测仍为阳性，方可判为阳性结果。本研究分析了26份小鼠血清样本的ELISA、IFA检测结果，初步评价了两种方法的真实性，为实验动物房MHV日常监测提供了借鉴。

1 材料与方法。

1.1 材料

MHV ELISA Kit：购自EBI-xpress Biotech International；小鼠肝炎病毒免疫荧光（IFA）试剂盒：购自苏州西山生物技术有限公司；待测样品：近2年来自不同屏障设施的26份SPF级小鼠血清。

1.2 主要仪器

多功能酶标仪：Multiskan Ascent，美国Thermo。智能型生物显微镜：LEICA DM5000B，德国Leica。恒温振荡仪：ZD-85，中国金坛富华。

1.3 检测方法

1.3.1ELISA试剂盒 检测过程依据试剂盒说明书进行。将26份待测样品按1∶50的体积比稀释（待检血清∶样本稀释液=10∶490），对结果使用Multiskan Ascent多功能酶标仪于405 nm波长读值。阴性对照血清、阳性对照血清均为试剂盒自带。

1.3.2IFA试剂盒检测 检测过程依据试剂盒说明书进行。将26份待测样品按1∶25的体积比稀释（待检血清∶样本稀释液=5∶120），使用LEICA DM5000B智能型生物显微镜对结果进行判读。……