周建波，俞焕苗，周怡

纯钛及钛合金由于其良好的生物相容性和卓越的机械性能而被广泛应用于牙种植体。但是，一般而言钛金属本质上是生物惰性的，很难直接与周围骨组织形成稳定牢固的骨结合。于是，学者们想出各种方法（如机械打磨、喷砂、酸蚀及热处理等）对种植体表面进行改性，以期获得良好的生物活性，促进成骨细胞的生长和种植体周围骨组织的形成[1-3]，但最近有研究表明热处理可能会改变种植体表面的结构和性能，从而产生有利或不利的影响[4-5]。本研究拟将成骨细胞接种到不同的钛片表面进行培养，观察成骨细胞早期黏附、增殖及分化的情况，以探讨热处理对该种植体表面活性的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 材料及试剂 商业纯钛片，直径为10 mm或30 mm，厚2 mm（宁波广慈医疗器械有限公司）；胎牛血清、-MEM培养基及胰酶（Gibco公司，美国）；曲拉通（TritonX-100，Sigma公司，美国）；多聚甲醛（Paraformaldehyde，ProSciTech公司，澳大利亚）；鬼笔环肽（Rhodamine phalloidin，Sigma公司，美国）；碘化丙啶（Propidiumiodide，Sigma公司，美国）；碱性磷酸酶活性测定试剂盒（Wako公司，日本）；骨钙素含量检测试剂盒（Biomedicaltechnology公司，美国）。荧光正置相差显微镜（ECLIPSE-80I，Nikon公司，日本）；多光谱酶标仪（产品型号：Spectra-Max Plus 384，厦门市宝能科技有限公司，中国）；图像处理软件（Image-proplus4，Media Cybernetics公司，美国）。

1.2 方法

1.2.1 钛片表面处理及分组 钛片表面先用320、500、800和1200目碳化硅水磨砂纸逐级打磨抛光，然后经大颗粒金刚砂喷砂处理，压力为4MPa；接着依次置于丙酮、75%乙醇、去离子水中各超声清洗15min，50℃干燥后备用。将喷砂清洗后的钛片用0.11mol/LHF和0.09mol/LHNO3混合液处理10 min，去离子水冲洗，50℃干燥；……