免疫性血小板减少症患者 CD19+CD24highCD27+及CD24highCD27+CD38highB调节细胞的表达

2018-02-12费菊萍寿黎红董晓辉曹丹方遒徐伟来韦菊英刘辉

现代实用医学 2018年5期

关键词：检测

费菊萍，寿黎红，董晓辉，曹丹，方遒，徐伟来，韦菊英，刘辉

B调节细胞（Breg）是一组诱导免疫耐受的免疫抑制细胞，其通过产生白介素10、白介素35、转化生长因子b（TGF-b）等细胞因子抑制病理性T细胞及其他炎症前淋巴细胞的扩增，从而抑制病理性的免疫过程。不同的炎症环境诱导产生不同的Breg细胞，目前人体中已鉴定出 CD24highCD27+[1]、CD19+CD24highCD27int[2]、CD19+CD24highCD38high[3]、CD19+CD25highCD71high[4-5]等多种Breg细胞，在感染、结缔组织病等中具有重要作用。为了研究 Breg细胞在免疫性血小板减少症（ITP）中的作用，笔者检测了 CDl9+CD24highCD27+细胞及 CD24highCD27+CD38high细胞在ITP患者外周血中的数量，以探讨Breg细胞在ITP中的作用。报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料收集2015年7月至2017年12月浙江省湖州市中心医院和浙江大学医学院附属第一医院收治的ITP患者80例，其中男33例，女47例；年龄16～80岁，中位年龄41岁。诊断和分期标准按成人原发免疫性血小板减少症诊断与治疗中国专家共识（2016年版）[6]。对照组为45例本院同期健康志愿者。

1.2主要试剂 CD19 FITC、CD27 APC及CD24 PE单抗均购自美国BD公司，CD38PE-CY7单抗购自美国beckman coulter公司。

1.3方法取外周血标本 2 m l，用乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝，采用流式细胞仪（FACS）检测表型为CD19+CD24highCD27+及 CD24highCD27+CD38high细胞。检测步骤：（1）取适量CD19、CD24、CD27 和CD38单抗，加入上样管中和100l外周血，轻轻振荡混匀，孵育15min；（2）加入2m l氯化铵裂解液的工作液，振荡均匀，作用 10min，1500 r/min 离心 5min，去上清；（3）加入100l磷酸盐缓冲液（PBS）重悬后上机检测。

1.4统计方法采用SPSS17.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差表示，两组比较采用检验，＜0.05为差异有统计学意义。