张兴会，宋先忱，王家明，全治国，丁世伟，陈 瑶，关乃鹏

（1.辽宁省畜牧科学研究院，辽阳 111000；2.辽宁省辽宁绒山羊原种场有限公司，盖州 115214；3.辽宁省动物疫病预防控制中心，沈阳 110164）

羊的副结核病是由副结核分支杆菌引发的一种慢性疾病，从近两年掌握的情况看，在辽宁省内各羊场的存栏羊只中的平均感染率已达到15%以上，感染途径主要为受病羊污染过的饲草、料及排泄物等，羊只起初为隐性感染，即病原携带者，过一段时期，部分羊体内产生抗体，其中有半数以上的羊在两年内因持续腹泻而死亡，由于尚无有效的治疗方法，给养羊业带来了较大的经济损失［1］。本调查主要采用ELASA检测方法，通过跟踪检测各年龄段感染羊只血清中的副结核分枝杆菌抗体变化水平，分析结果相关性，为今后更有效地检测及防控副结核病提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与分组

1.1.1 ELISA抗体检测材料 负压采血管，离心管，副结核分枝杆菌抗体检测试剂盒（IDEXX），MAP抗原包被板，阳性对照液，阴性对照液；未包被微量板，离心机，单道微量移液器，一次性移液吸头，微量反应震荡器，96孔酶标仪。

1.1.2 血清样本 选自辽宁绒山羊联合育种场的羔羊，育成羊与后备羊，成年母羊。

1.1.3 时间及地点 时间：2015年4月至2017年10月；地点：辽阳市辽阳县吉洞乡。

1.1.4 分组 副结核阳性母羊所产羔羊为Ⅰ组（17只）、副结核阴性母羊所产羔羊为Ⅱ组（125只），育成羊与后备羊121只，成年羊351只。

1.2 检测方法

按照副结核分枝杆菌ELISA抗体检测试剂盒说明书的操作方法进行，判定标准如下：S/P%小于或等于45%，判定为抗体阴性（“-”）。S/P%大于45%且小于55%，判定为抗体可疑（“±”），应重新检测；S/P%大于或等于 55%，判定为抗体阳性（“+”）［1］。

2 调查结果

2.1 羔羊副结核抗体跟踪检测

表1中副结核阳性母羊所产羔羊，在2～4月龄时有28%（5/17）的羊只可在血清中检出副结核抗体，而这样抗体滴度可持续到断乳结束前。而副结核抗体呈阴性母羊所产的125只羔羊，在哺乳期只有2只的“一过性”的感染。

表1 不同月龄羔羊ELISA方法检测副结核抗体结果

2.2 育成羊副结核抗体跟踪检测

由表2可知，对121只育成羊与后备羊进行副结核抗体跟踪检测，从10月龄检测结果看出，其中2只疑似羊、16只阳性羊，查对产羔记录，在阳性与疑似羊的母亲中有3只为副结核阳性羊，占16.6%（3/18）,表明副结核阳性的育成羊不是主要来自副结核母羊的后代。间隔3个月检测，16只阳性羊中14只转阴、2只疑似转阳，而后两次跟测中，阳性羊中有1只未转阴，说明在育成羊阶段副结核的感染也只是一种继往感染，抗原在血清内形成抗体为“一过性”的反应。从16～21月龄检测结果看，此阶段受副结核感染的羊只有陆续出现的趋势，且体内抗体阳性的持续时间较长。

表2 育成羊与后备羊ELISA方法检测副结核抗体结果

2.3 成年羊副结核抗体跟踪检测

从表3可看出，对351只成年母羊持续半年监测副结核抗体，首检阳性羊48只，感染率13.7%（48/351），在2个月后的二检中，有5只转为阴性，在5～6个月后检测结果3只为阴性，2只为阳性，说明个别感染者其血清中抗体会呈现一种波动状态；二检为阳性的43只，在后续的检测中始终为阳性，为真正感染者，并开始陆续发病，有2只死亡。首检中10只羊为抗体疑似，最终有6只发展为阳性、4只转阴。首检的293只阴性羊，在2个月后出现阳性23只，5个月后累计阳性达33只、疑似4只、阳转阴性4只；之后的检测中，阴性羊中首次查出的阳性羊有少量在下次检测中转阴，疑似羊则大部分在后一次检测中转阳，而阴性羊以后的检测中会陆续出现少量阳性羊。

表3 351只成年母羊ELISA方法检测副结核抗体结果

3 讨论与分析

（1）本调查结果表明，羊副结核的感染不是在羔羊期，副结核母羊所产羔羊，即使在哺乳期可查出阳性者，但断乳后都会恢复阴性。哺乳期只有极少部分羔羊出现“一过性”的感染，这应与其母源抗体的水平及所处环境有关。副结核抗体可在血清中测出，母乳中也会有抗体存在，即使羔羊期受到抗原感染，因免疫应答不完善，大部分羔羊血清检测不出副结核抗体。只有血清中出现抗体之后，感染羊只才能有发病的临床表现。从断奶后至13月龄（育成羊）检测结果看，也会呈现出与哺乳期类似的结果，因此，某个羊场若需对副结核羊进行净化，盲目地筛查12月龄前的羊只是没有意义的。

（2）育成羊之后阶段，羊只的免疫应答系统逐渐完善，即从1周岁开始，携带副结核抗原的个体会开始陆续产生抗体，如缩短检测间隔期，会出现抗体从阴性到疑似及至阳性的结果。现今的绒山羊种羊场，有必要对成年羊进行副结核抗体检测，对首检的呈阳性羊和疑似羊应隔离或淘汰处理。因抗体为阴性的羊只，有可能也已携带抗原，未进行到形成抗体阶段，结合本次调查的经验，可采取首检后3个月进行二检，二检后1个月进行三检，以达到逐步净化副结核羊的目的。

（3）目前，采用ELISA法检测副结核抗体的准确率在95%左右［2］，对有较高种用价值的个体，有必要进行跟踪检测，二检若为阴性，在其后的检测中再次检出阳性亦可按阳性羊处理。

（4）副结核抗体为阳性的羊只中，有30%～40%可终身不发病。但在营养状况不佳的环境下，感染羊1年内死亡率即可超过50%，给羊场带来巨大的经济损失。对于有种用价值的副结核羊，在不影响健康羊群的情况下，可采取隔离处理后，提供充足的营养及配套管理，还可继续利用及繁衍后代。

就母羊而言，其发病的集中阶段是在妊娠后期及哺乳期，此时期其营养代谢繁重，极易诱发阳性羊出现消瘦、持续腹泻等症状，发病羊会在几天内死亡。因此，加强妊娠期及哺乳期副结核羊的饲养管理也尤为重要。

［1］申贯男，曹东，赵晓彤，等.辽宁地区羊副结核病血清学调查［J］.黑龙江畜牧兽医，2017（4下）：135-137.

［2］张兴会，宋先忱，王世泉，等.两种方法检测绒山羊副结核的效果分析［J］.中国草食动物科学，2017，37（1）：38-40.