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硫氧还蛋白相互作用蛋白在大鼠急性肾损伤中的作用*

2018-01-29汪华新肖业达赵博唐朝亮黄亚医詹丽英高文蔚

中国现代医学杂志 2018年3期
关键词:氧化应激检测

汪华新,肖业达,赵博,唐朝亮,黄亚医,詹丽英,高文蔚

(武汉大学人民医院 1.麻醉科,2.重症医学科,湖北 武汉 430060)

肾缺血再灌注损伤是导致急性肾损伤的主要原因,也是临床上常见的病理生理过程,可发生休克、肾移植术及心脏大血管手术等情况。氧化应激和强炎症反应则是肾缺血再灌注损伤最为重要的原因之一[1-2]。炎性体3蛋白(nod-like receptor protein 3,NLRP3)/白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)炎症通路在肾缺血再灌注损伤中起到重要作用,而硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interacting protein,TXNIP)可以激活NLRP3/IL-1β炎症通路[3-4]。本研究拟评价TXNIP激活NLRP3/IL-1β炎症通路在大鼠急性肾损伤中的作用。

1 材料与方法

1.1 动物选择及分组

清洁级健康成年雄性Sprague Dawley大鼠16只,体重200~220 g,购自北京华阜康生物科技股份有限公司。采用随机数字表法分为2组(n=8):假手术组(S),缺血再灌注组(IR)。

1.2 大鼠肾缺血再灌注损伤模型的复制

大鼠经腹腔注射2%戊巴比妥钠60 mg/kg后,腹腔注射500 u普通肝素钠抗凝,取腹部正中切开显露肾脏,在双侧肾蒂处进行钝性分离,无创血管夹夹闭双侧肾蒂25 min后开放,肾脏由鲜红转为暗红偏黑表明阻断成功,肾脏由暗红偏黑恢复到鲜红提示再灌注成功。

1.3 指标测定

再灌注48 h后处死大鼠,取肾组织和血标本,①HE染色观察大鼠病理学结果,肾脏标本浸泡于10%中性甲醛固定液固定24 h,石蜡包埋,用切片机将其切成4 μm石蜡薄片,切片常规二甲苯脱蜡,经各级乙醇后水洗,常规脱水,封片后光镜下观察病理学结果;②左心室取血标本检测血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,Scr)水平,血标本1 ml,3 000 r/min离心5 min,取血清,采用全自动生化分析仪测定BUN和Scr;……

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