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(1.北京食品营养与人类健康高精尖创新中心,北京工商大学,北京 100048;2.食品添加剂与配料北京市高校工程研究中心,北京 100048)

海藻酸钠是由1,4-聚-B-D-甘露糖醛酸和A-L-古罗糖醛酸构成的线型聚合物,其具有无毒无害、不容易降解及生物相容性好等优点[1-2]。在温和条件下,海藻酸钠可以实现对蛋白质等生物大分子的包埋[3]。壳聚糖分子构成为(1,4)-2-氨基-2脱氧-β-D-葡萄糖胺,是天然多糖高分子材料[4],因其无毒、具有生物可降解性、生物活性等特性而具有广泛应用[5-6]。明胶是由胶原部分水解而得到的一类蛋白质,具有组织相容性、低抗原性、成膜性等优良特性[7-8],为固定化酶的优良载体[9]。用于固定化酶的天然高分子材料还有淀粉、甲壳素等[10]。因明胶、壳聚糖、海藻酸钠来源广泛、生物相容性好、成本低廉等优点,故选作本研究固定化酶的载体。

近年来,使用复配材料逐渐成为固定化酶研究的热门。张智等[11]利用海藻酸钠、海藻酸钠-明胶、海藻酸钠-壳聚糖固定化磷脂酶,根据酶学特性得到最佳载体为海藻酸钠-壳聚糖混合材料。陆兵等[12]对红芝LYL263漆酶进行不同凝胶体系的固定化研究发现海藻酸钠-壳聚糖-明胶固定化漆酶酶活最高。微胶囊作为固定化载体,扩散性是一重要指标[13]。有研究者指出有明胶参与的胶囊网孔更大,更有利于物质的包埋和内外物质的扩散[14]。但纯明胶存在干燥后质地脆、可被蛋白酶酶解[15]等缺点,通常对明胶进行改性处理以提高其稳定性等性能。

本文分别使用明胶和改性明胶与壳聚糖、海藻酸钠固定木瓜蛋白酶,以硬度和酶活为指标进行比较研究,评价了使用明胶和改性明胶对固定化木瓜蛋白酶的影响,为固定化木瓜蛋白酶提供了一种新思路。……