一种快速检测含tst基因的金黄色葡萄球菌的纳米生物传感器
2018-01-08李明阳贺气志马春霞俞建昆
李明阳 贺气志 马春霞 俞建昆
(1. 中国医学科学院 北京协和医学院 医学生物学研究所 中心实验室,昆明 650118;2. 长沙医学院 基础医学院 应用生物学教研室,长沙 410219)
一种快速检测含tst基因的金黄色葡萄球菌的纳米生物传感器
李明阳1贺气志2马春霞1俞建昆1
(1. 中国医学科学院 北京协和医学院 医学生物学研究所 中心实验室,昆明 650118;2. 长沙医学院 基础医学院 应用生物学教研室,长沙 410219)
基于荧光能量共振转移(Fluorescence energy resonance transfer,FRET)原理利用单壁碳纳米管(Single-walled carbon nanotubes,SWCNTs)构建一种操作简单、成本低、灵敏度高和选择性强的纳米生物传感器快速检测含有tst基因金黄色葡萄球菌。将tst基因互补序列设计为探针,利用单壁碳纳米管联合羧基荧光素(FAM)标记的DNA分子探针(FAM-P)构建出FAM-P/SWCNTs复合检测体系。考察该体系对靶标序列和靶标菌的灵敏度和特异性。结果表明,该生物传感器对靶标序列的检测下限低至10 nmol/L,并在10-100 nmol/L 范围内具有较好的线性关系(R2= 0.994),对靶标菌的检测下限低至102,且在102-107CFU/mL范围内均呈现良好的线性关系(R2= 0.999)。此外,在错配实验和对非靶标菌检测时,该传感器呈现了较高的特异性。本研究构建的FAM-P/SWCNTs体系能快速检测含tst基因金黄色葡萄球菌,并具有操作简单、灵敏度高、特异性强等优点,为食品检测、临床诊断等领域开辟了新途径。
单壁碳纳米管;荧光标记的核酸探针;tst 基因;金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)分布极广,主要存在于各类熟肉制品、乳及乳制品、蛋及蛋制品[1],可引起局部化脓感染,也可引起肺炎甚至败血症、脓毒症等全身感染的致病菌[2]。……
