梁艳君 谭喜梅 黄燕琼 秦华珍#

1 浙江中医药大学附属第三医院 浙江 杭州 310005

2 广西中医药大学 广西 南宁 530001

3 广西中医药大学附属瑞康医院 广西 南宁 530011

红豆蔻等3味山姜属中药的提取工艺研究*

梁艳君1谭喜梅2黄燕琼3秦华珍2#

1 浙江中医药大学附属第三医院 浙江 杭州 310005

2 广西中医药大学 广西 南宁 530001

3 广西中医药大学附属瑞康医院 广西 南宁 530011

目的：研究红豆蔻、草豆蔻、益智3味中药的最佳提取工艺。方法：运用L9（34）正交试验设计法优选工艺，采用提取溶剂、溶剂倍量、提取时间、提取次数为因素的正交设计，以干膏率作为筛选指标。结果：最佳提取工艺为：采用60%乙醇，溶剂倍量为30倍，提取时间为4h，提取次数2次。结论：所得结果的提取方法简单、效率高。

红豆蔻 草豆蔻 益智 正交试验 提取工艺

红豆蔻、草豆蔻、益智均为姜科山姜属（Alpinia L.）中药，本实验采用L9（34）正交试验优选提取条件，以药材干膏率为考察指标，确定3味中药的最佳提取工艺条件，从而较完全地提取出有效成分，为后期进行中药亲缘关系物质基础与药性、效用相关研究奠定基础。

表1 提取方法对药材提取率的影响

1 材料

试验用红豆蔻、草豆蔻、益智药材经广西中医药大学中药鉴定学教研室田慧教授鉴定均为姜科山姜属（Alpinia L.）药物。

2 方法与结果

2.1 单因素考察[1]：分别对提取方法[2]、乙醇体积分数、乙醇用量及提取时间进行单因素考察。每个试验组[3]均称取药材粗粉10g，分别加入相应的溶剂，提取，过滤，得滤液。所得滤液均减压回收溶剂，置于干燥的蒸发皿中水浴挥干溶剂，减压干燥至恒重，称重，计算干膏率，具体方法如下，结果见表1～5。由表1可知，红豆蔻、草豆蔻和益智采用加热回流提取方法提取率较高，所以选择加热回流提取法。由表2可知，3味山姜属中药采用甲醇提取率较高，但因甲醇毒性较大，所以选择乙醇作为提取溶剂。由表3可知，采用60%乙醇回流提取所得干膏率最高，75%及80%乙醇回流提取所得干膏率也较高，但差别不大。由表4可知，随着料液比的增加，药材的提取率也随之增加，但乙醇用量对提取得到的干膏率影响不大。由表5可知，采用加热回流提取方法，随着提取时间的延长药材提取率相应增加，但提取时间到4h和5h时提取率增加不明显。

表2 提取溶剂对药材提取率的影响

表3 乙醇浓度对药材提取率的影响

表4 乙醇用量对药材提取率的影响

表5 提取时间对药材提取率的影响

2.2 正交试验设计与结果：根据单因素试验结果，采用L9（34）正交设计[4]对乙醇浓度（%）、提取时间（h）、乙醇用量（倍）、空白对照进行正交试验[5]，每个因素设3个水平[6]，详见表6。

表6 正交试验因素水平安排表

继以干膏率为考察指标，进行提取工艺优选，试验结果见表7～12。由表7可知，影响红豆蔻药材干膏提取率的因素大小顺序是A＞B＞C，最佳因素排列为A2B2C3，即加入30倍量的60%乙醇回流提取2次，每次4小时，提取得到的干膏量最多。

由表8可知，影响草豆蔻药材干膏提取率的因素大小顺序是A＞B＞C，最佳因素排列为A2B2C3，即加入30倍量的60%乙醇回流提取2次，每次4小时，提取得到的干膏量最多。

由表9可知，影响益智药材干膏提取率的因素大小顺序是A＞B＞C，最佳因素排列为A2B3C3，即加入30倍量的60%乙醇回流提取2次，每次5小时，提取得到的干膏量最多。

表7 红豆蔻正交试验表与结果

表8 草豆蔻正交试验表与结果

表9 益智正交试验表与结果

表10 红豆蔻方差分析结果

表11 草豆蔻方差分析结果

表12 益智方差分析结果

另由表10～12的方差分析结果可知，乙醇浓度、提取时间和乙醇用量对3味药材的干膏提取率影响均有显著性差异。

根据上述实验结果发现，影响红豆蔻、草豆蔻和益智3味山姜属中药干膏提取率的因素存在一定的差异性，为了能够更好地比较其化学成分的差异，应选择一致的提取工艺条件。综合考虑这3味中药的化学成分性质和上述实验结果，可以得出结论，采用60%乙醇提取得到的浸膏量最多，所以确定这3味中药提取工艺为：采用60%乙醇，溶剂倍量为30倍，提取时间为4h，提取次数2次。

2.3 最佳工艺验证：按照已优选的最佳提取工艺对3批样品进行提取、制备、按前述方法对干膏率进行测定，结果见表13。

表13 工艺验证结果

3 讨论

由于山姜属中药化学成分复杂多样，而浸膏得率在一定程度上可反映出中药材中多种有效成分的提取率。本研究选择浸膏得率作为考察指标，采用单因素考察和正交设计方法优选出的红豆蔻、草豆蔻和益智3味山姜属中药的提取工艺为采用60%乙醇，溶剂倍量为30倍，提取时间为4h，提取次数2次。该方法稳定、可行，重复性好，为中药提取、化学成分分析及其药理作用研究奠定了基础。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典·一部[M].北京：中国医药科技出版社，2010：VID33-34.

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2017-05-16