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太白山土壤放线菌分离方法及生态分布规律

2017-12-18来航线韦小敏姜影影

干旱地区农业研究 2017年5期
关键词:高氏放线菌全氮

王 鹤,彭 楚,来航线,韦小敏,姜影影

(西北农林科技大学资源环境学院,陕西杨凌712100)

太白山土壤放线菌分离方法及生态分布规律

王 鹤,彭 楚,来航线,韦小敏,姜影影

(西北农林科技大学资源环境学院,陕西杨凌712100)

研究了改良高氏培养基、甘油-天门冬酰胺培养基、R2A培养基、改良高氏二号培养基、海藻糖-脯氨酸培养基对太白山不同植被土壤放线菌的分离效果,并分析放线菌的生态分布规律。结果表明:太白山南北坡土壤养分大体呈现为中海拔林地含量相对较高,有机质和全氮含量最高分别为77.81 g·kg-1和5.35 g·kg-1,低海拔林地与高海拔林地含量相对较低,有机质和全氮含量最低分别为11.77 g·kg-1和0.85 g·kg-1,即自低海拔至高海拔不同林地类型土壤养分整体呈现先升高后降低的趋势;甘油-天门冬酰胺培养基分离的放线菌数量与种类均高于其它培养基,其数量最高可达258×104cfu·g-1土,种类最多为35种;改良高氏培养基分离南坡的效果优于北坡;R2A培养基分离中高海拔林地土壤优势更明显。中海拔林地类型,如北坡的红皮桦、牛皮桦,南坡的牛皮桦,分离的放线菌数量均显著高于其它林地类型;土壤速效磷和全氮含量对放线菌的分离效果影响较大。

土壤养分;放线菌;分离方法;生态分布;太白山

放线菌是微生物中与人类关系非常密切且有实用价值的一类菌,以其较强的次级代谢产物能力而为人们所熟知,可作为抗生素、维生素、酶和酶抑制剂的产生菌,是一类具有实际价值的微生物资源。迄今为止,微生物产生的2万多种生物活性物质中有超过一半都是由放线菌产生的,而且目前广泛应用的抗生素约70%也是由放线菌产生。这些抗生素的发现和应用不仅对人类健康起着不可替代的作用,还给人们带来了巨大的经济效益[1]。目前,关于放线菌资源的研究主要集中在现有物种中新活性物质的开发以及新物种的分离两个方面。

秦岭是我国自然地理和气候的南北分界线。太白山是秦岭主峰,最高海拔3 767m[2]。太白山以其巨大的高山落差,形成了独有的垂直气候带,自下而上分布着暖温带、温带、高山寒温带、高山亚寒带及高山寒带5个明显的气候带[3]。其植被类型及土壤类型差异明显,水热条件迥异,是理想的放线菌分离源。但目前对放线菌的研究主要集中在北坡,对南坡以及南北坡综合比较研究较少。

本研究选用太白山南北坡不同海拔高度的13个典型植被土壤为研究材料,通过设计不同养分的培养基质研究不同林地类型土壤放线菌分离效果,得到适合不同林地及不同坡向的培养基;并分析太白山不同林地放线菌生态分布规律,旨在为后续不同林地类型放线菌分离培养基质选择提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

1.1.1 土壤样品 13种供试土样采自秦岭主峰太白山(33°52′88″~34°04′22″N,107°41′86″~107°49′00″E)。选取5个采样点进行采样,去除表面的枯枝落叶层及腐殖层,采集其下的土层,充分混合后四分法取土,装入无菌塑封袋中。将样品带回实验室后,土样自然风干20 d,研磨过1 mm筛,装入塑封袋中备用。供试土壤样品采集点的环境条件见表1。

1.1.2 培养基

(1)改良高氏培养基[4](G):可溶性淀粉 15.0 g,腐殖酸 0.5 g,硝酸钾 1 g,磷酸氢二钾 0.5 g,硫酸镁 0.5 g,七水合硫酸亚铁 0.02 g,维生素族 0.5 mg,琼脂 15 g,pH 7.2~7.4,自来水 1 000 mL。(维生素族:维生素B1、核黄素、烟酸、维生素B6、泛酸钙、肌醇、P-氨基苯甲酸各0.5mg,生物素0.25mg,下同)

(2)甘油 -天门冬酰胺培养基[5](L):L-天门冬酰胺1 g,甘油10 g,磷酸氢二钾0.5 g,微盐溶液1 mL,琼脂 15 g,pH 7.2,自来水 1 000mL。

(3)R2A培养基[6](R):酵母粉 0.5 g,胰蛋白胨0.25 g,蛋白胨 0.75 g,葡萄糖 0.5 g,淀粉 0.5 g,磷酸氢二钾 0.3 g,硫酸镁 0.024 g,丙酮酸钠 0.3 g,琼脂 15 g,pH 7.2,自来水 1 000mL。

(4)改良高氏二号培养基[7](E):葡萄糖 1 g,蛋白胨 0.5 g,胰胨 0.3 g,氯化钠 0.5 g,复合维生素0.5 mg,琼脂 15 g,pH 7.2,自来水 1 000 mL。

(5)海藻糖 -脯氨酸培养基[7](D):海藻糖 5 g,脯氨酸 1 g,硫酸铵 1 g,氯化钠 1 g,氯化钙 2 g,磷酸氢二钾1 g,硫酸镁1 g,复合维生素0.5 mg,琼脂15 g,pH 7.2,自来水 1 000mL。

纯化培养基统一采用改良高氏培养基。

1.1.3 抑制剂 5种分离培养基抑制剂均选用重铬酸钾,浓度为 80μg·mL-1。

1.2 试验方法

1.2.1 土壤养分含量的测定 土壤养分测定参照

《土壤农化分析》[8],其中 pH采用 pH计测量,有机质采用重铬酸钾外加热氧化法测定,全氮采用凯氏定氮法测定,速效氮采用流动分析仪法测定,速效磷采用NaHCO3浸提-钼锑抗比色法测定,速效钾采用NH4OAc浸提,火焰光度计法测定。

1.2.2 放线菌的分离及培养 采用稀释平板涂布法进行分离[9]。分别称取5.0 g供试土样加入装有45mL无菌水的三角瓶中,180 r·min-1震荡 30 min进行10-1稀释,依次吸取 1.0 mL加入 9.0 mL无菌水中做 10-2、10-3稀释。分别吸取 0.1 mL 10-2、10-3两个稀释度的样品悬液涂布于5种分离培养基上,置于28℃培养15 d,将培养皿中形态明显不同的菌落视为不同种类,对其数量及种类进行统计;将菌株接入改良高氏斜面,28℃培养7 d保存。

1.3 数据分析

采用SAS 9.0对数据进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同林地类型土壤养分特征

土壤养分含量对微生物的构成意义重大。对13个土样的部分养分含量进行分析,结果见表2。

表2 太白山不同植被土壤基本理化性质Table 2 Basic chemical properties of the soil samples on Taibaimountain

由表2知,太白山北坡供试土壤pH值为5.07~6.58,太白红杉和牛皮桦显著高于其它植物,锐齿栎最低;有机质含量介于 23.85~77.58 g·kg-1,巴山冷杉土壤的有机质含量显著高于其它植物,锐齿栎土壤最低;全氮含量介于 0.85~2.81 g·kg-1,其中巴山冷杉土壤的全氮含量显著高于其它植物,辽东栎次之,锐齿栎土壤最低;铵态氮含量介于2.13~9.63mg·kg-1,巴山冷杉、高山草甸、红皮桦、太白红杉、红皮桦、辽东栎、锐齿栎差异显著;硝态氮含量介于 3.42~10.15mg·kg-1,其中锐齿栎土壤硝态氮含量显著高于其它植物,辽东栎次之,牛皮桦土壤最低;速效磷含量介于 2.69~4.05 mg·kg-1,其中辽东栎和红皮桦土壤显著高于其它植物,锐齿栎、太白红杉、牛皮桦、高山草甸差异显著;速效钾含量介于50.42~242.31mg·kg-1,其中巴山冷杉土壤的速效磷含量显著高于其它植物,牛皮桦次之,高山草甸和辽东栎土壤最低。综合各类指标,巴山冷杉土壤肥力最高,锐齿栎和高山草甸最低。

由表2还可知,太白山南坡供试土壤pH值介于5.68~6.41,红皮桦、牛皮桦和高山灌丛显著高于其它植物,高山草甸、太白红杉和锐齿栎含量最低;有机质含量介于 11.77~77.81 g·kg-1,高山灌丛土壤的有机质含量显著高于其它植物,锐齿栎土壤最低;全氮含量介于 0.89~5.35 g·kg-1,巴山冷杉土壤的全氮含量显著高于其它植物,红皮桦和牛皮桦基本持平,太白红杉、锐齿栎、高山草甸、高山灌丛差异显著;铵态氮含量介于 2.20~11.93 mg·kg-1,红皮桦、牛皮桦、巴山冷杉、高山草甸、高山灌丛、太白红杉、锐齿栎差异显著;硝态氮含量介于 3.49~12.06mg·kg-1,太白红杉、巴山冷杉、高山灌丛、红皮桦、牛皮桦、高山草甸、锐齿栎差异显著;速效磷含量介于 2.69~7.15 mg·kg-1,其中红皮桦土壤显著高于其它植物,高山草甸土壤最低;速效钾含量介于63.65~202.38 mg·kg-1,太白红杉、红皮桦、高山灌丛、牛皮桦、锐齿栎、巴山冷杉、高山草甸差异显著。综合各类指标,太白红杉和牛皮桦肥力较高,锐齿栎和高山草甸最低。

综合比较南北坡养分含量可知,南坡pH值为5.68~6.41,北坡 pH含量为 5.07~6.58,北坡变幅比南坡大,北坡最低pH为5.07;有机质含量差异较大,最大为 77.81 g·kg-1,最小为 11.77 g·kg-1;南坡供试土壤全氮含量最高为 5.35 g·kg-1,北坡仅为2.81 g·kg-1,南坡土壤全氮含量高于北坡;硝铵态氮含量南北坡差异不大;速效磷含量南坡最高值为7.15mg·kg-1,北坡最高值为 4.05 mg·kg-1,南坡土壤速效磷含量高于北坡;速效钾含量南北坡基本持平。整体而言,太白山南北坡土壤养分大体呈现中海拔林地含量相对较高,如巴山冷杉,低海拔林地与高海拔林地含量相对较低,如锐齿栎和高山草甸,即自低海拔至高海拔不同林地类型土壤养分整体呈现先升高后降低的趋势。且南坡的土壤养分含量较北坡高,这可能是由于南坡光照充足,温度较高,水热条件更有利于微生物活动,因而促进了养分积累。

2.2 不同培养基放线菌分离效果

培养基直接为放线菌提供生长繁殖所必需的各种碳源、氮源、无机盐及生长因子等,不同放线菌种类对营养物质的需求不同。采用5种培养基对太白山南北坡海拔高度不同的13种典型林地土壤中的放线菌进行了分离,分离效果见表3,表4。

表3 5种培养基分离的放线菌数量/(104 cfu·g-1)Table 3 Isolated soil actinomycete quantity in five kinds of culturemedium

2.2.1 放线菌数量 由表3分析北坡放线菌数量可知,甘油-天门冬酰胺培养基(L)分离锐齿栎、辽东栎、红皮桦和高山草甸土壤中放线菌的效果明显优于其它培养基,数量最高可达258×104cfu·g-1土,分离牛皮桦与R2A培养基(R)相当,而分离巴山冷杉、太白红杉土壤中放线菌效果略低于R2A(R);R2A培养基(R)除在分离锐齿栎和辽东栎效果低于其它培养基,在其它土壤类型放线菌的分离效果都优于或与其它培养基持平;改良高氏(G)和改良高氏二号(E)分离效果表现一般;海藻糖-脯氨酸(D)分离效果不佳,仅为 2.0~7.0×104cfu·g-1土,但该培养基主要用于分离稀有放线菌,数量不占优属正常。5种培养基中,甘油-天门冬酰胺培养基(L)分离放线菌数效果最好,R2A培养基(R)次之,海藻糖-脯氨酸培养基(D)最差。

由表3分析南坡可知,改良高氏培养基(G)分离红皮桦土壤放线菌的数量与改良高氏二号培养基(E)相近,并显著高于其它培养基,在分离高山草甸土壤放线菌时甘油-天门冬酰胺培养基(L)效果最好,并显著高于其它培养基;甘油-天门冬酰胺培养基(L)分离高山草甸土壤效果最好;R2A培养基(R)分离太白红杉土壤中放线菌的效果明显优于其它培养基;海藻糖-脯氨酸培养基(D)分离时污染严重,故未作分析。5种培养基中,改良高氏(G)和甘油-天门冬酰胺培养基(L)分离放线菌数效果最好,R2A培养基(R)较好。

综合分析南北坡分离的放线菌数量可知,甘油-天门冬酰胺培养基(L)分离放线菌效果最好,数量最高可达 258×104cfu·g-1土;R2A培养基(R)次之,该培养基在中海拔以上的分离效果优势更明显;改良高氏培养基(G)在南坡分离放线菌的数量明显高于北坡;改良高氏二号培养基(E)整体表现一般。不同培养基分离放线菌数量差别可能与培养基本身养分构成有关,同时受海拔高度、光照及温度、植被类型、土壤养分等影响。

表4 5种培养基分离的放线菌种类数Table 4 Numbers of isolated soil actinomycetetypes on five kinds of culturemedium

2.2.2 放线菌种类 由表4分析北坡可知,甘油-天门冬酰胺(L)培养基分离锐齿栎、辽东栎和高山草甸土壤放线菌的效果明显优于其它培养基,分离红皮桦、牛皮桦、巴山冷杉土壤放线菌的效果与R2A(R)培养基相当,为35种;R2A培养基(R)除分离锐齿栎土壤放线菌效果劣于其它培养基外,对其它类型土壤放线菌的分离效果优于或等于其它培养基;改良高氏(G)和改良高氏二号(E)培养基分离效果不明显;海藻糖-脯氨酸(D)培养基分离放线菌种类较少,但该培养基主要用于分离稀有放线菌,分离种类数上不占优属正常,且其得到的放线菌形态观察较特别。5种培养基中,甘油-天门冬酰胺培养基(L)分离放线菌种类最多,R2A培养基(R)次之。

首先,一经发现有生猪发病,则应当立即将病猪与其他猪群进行隔离,并针对猪舍进行严格、彻底的清理,消除疾病对其他生猪所产生的潜在威胁。倘若发现该疾病存在扩散、感染的趋势,则应当将产生类似症状的病猪进行严格隔离,并针对饲养环境、猪舍进行彻底的清洁与消毒,还要针对运输工具、饲养用具以及饲养服等进行全面消毒。此外,针对发病死亡的尸体、病猪排泄物以及饲养过程中产生的其他废弃物也要依照卫生标准进行无害化处理,避免疫病的再次传播与蔓延。

由表4,分析南坡放线菌种类可知,甘油-天门冬酰胺(L)培养基分离高山灌丛和高山草甸土壤中放线菌的效果明显优于其它培养基,分离锐齿栎、巴山冷杉、太白红杉土壤放线菌的效果与R2A(R)培养基相当;R2A(R)和改良高氏(G)培养基的分离效果基本一致,改良高氏二号(E)培养基的分离效果不佳,海藻糖-脯氨酸(D)分离过程霉菌污染严重,故未作分析。5种培养基中,甘油-天门冬酰胺培养基(L)分离放线菌种类最多,R2A(R)和改良高氏(G)培养基次之。

综合分析南北坡分离的放线菌种类可知,甘油-天门冬酰胺培养基(L)分离放线菌种类最多,为35种;R2A(R)和改良高氏(G)培养基分离效果相当,低于甘油-天门冬酰胺培养基(L);海藻糖-脯氨酸培养基(D)分离放线菌种类数最少,仅为4种,但初步形态学鉴定结果显示其种类较为独特,可见其分离稀有放线菌确有优势。不同培养基分离放线菌种类差别可能主要与培养基养分构成、植被类型等相关。

2.3 不同林地类型放线菌的分离效果及分布规律

图1 太白山不同植被土壤分离放线菌数量Fig.1 Actinomycete quantity of the soil samples on Taibaimountain

图2 太白山不同植被土壤分离放线菌种类Fig.2 Numbers of actinomycete types of the soil samples on Taibaimountain

土壤是放线菌生长的天然场所,不同植被类型的土壤中蕴藏的放线菌资源存在一定差异。选取代表性最好的甘油-天门冬酰胺培养基对太白山南北坡海拔高度不同的13种典型林地土壤中放线菌的分布规律进行了分析,结果见表3,表4,图1,图2。2.3.1 不同林地类型分离放线菌的数量及分布规律 分析北坡不同植被分离的放线菌数量可知,红皮桦分离的放线菌数量为 258.0×104cfu·g-1土,明显高于其它林地类型;牛皮桦、辽东栎和锐齿栎土壤分离放线菌数量差异较小,但均显著低于红皮桦;巴山冷杉、太白红杉和高山草甸土壤分离放线菌数量相较于前四种土壤类型,显著降低。

分析南坡不同植被分离的放线菌数量可知,牛皮桦分离的放线菌数量为 225.0×104cfu·g-1土,明显高于其它林地类型;锐齿栎较红皮桦低,但显著高于其它植被;巴山冷杉和红皮桦之间分离数量差别不大,均低于牛皮桦和锐齿栎;太白红杉、高山灌丛、高山草甸分离的放线菌数量依次呈现显著差异。

由图1可知,锐齿栎和红皮桦放线菌的分离数量北坡高于南坡,牛皮桦、巴山冷杉和太白红杉分离放线菌数量北坡低于南坡,可见随着海拔的升高,南坡土壤放线菌数量逐渐增加。南北坡不同植被分离放线菌的数量,均随着海拔升高,先升高后降低,这与土壤养分的变化趋势是一致的。这可能是由于海拔升高,光照充足,温度升高,有利于微生物的活动。

2.3.2 不同林地类型分离放线菌的种类及分布规律 分析北坡不同林地类型分离的放线菌种类可知,辽东栎和锐齿栎分离放线菌种类数高于或显著高于其它林地类型,分离的种类数分别为35种和30种;太白红杉较二者低,但显著高于其它林地类型;牛皮桦和红皮桦分离的放线菌种类数无差异;太白红杉中分离的放线菌种类最少,为13种。

由图2可知,锐齿栎、牛皮桦和太白红杉的分离种类数北坡高于南坡,红皮桦分离的种类数南北坡大致相当,巴山冷杉的分离种类数北坡低于南坡。南北坡不同林地类型分离放线菌的种类数均表现出随着海拔升高先降低后升高又降低的趋势。

2.4 放线菌数量与土壤养分的相关性

土壤微生物数量与土壤理化性质密切相关[10-11]。分析五种培养基分离的放线菌数量与土壤养分的相关性,结果见表5,表6。

由表5,分析各养分之间关系可知,pH和有机质、全氮、硝铵态氮和速效钾之间表现为正相关关系,与硝态氮的相关性达显著水平,与速效磷呈负相关关系。有机质与全氮和速效钾呈显著的正相关关系,同铵态氮呈极显著正相关关系,与硝态氮和速效磷呈负相关关系。铵态氮和速效磷呈显著负相关关系,与速效钾呈显著正相关关系。硝态氮与速效磷、速效钾均呈正相关关系。速效磷与速效钾呈负相关关系。分析养分与各培养基之间关系可知,改良高氏(G)、甘油 -天门冬酰胺(L)和改良高氏二号(E)培养基分离的放线菌数量与速效磷含量均呈显著正相关关系,而与pH、有机质、全氮、铵态氮、速效钾均呈负相关关系。R2A培养基与速效磷呈正相关关系。海藻糖-脯氨酸(D)培养基与全氮呈显著负相关关系。

由表6分析各养分之间关系可知,pH和有机质、全氮、硝铵态氮、速效磷、速效钾之间表现为正相关关系,与铵态氮相关性极显著。有机质与全氮、硝铵态氮、速效钾均呈正相关关系,与速效磷呈负相关关系。全氮与硝铵态氮、速效磷呈正相关关系,与铵态氮相关性显著,与速效钾呈负相关关系。硝铵态氮与速效钾呈正相关关系。速效磷与速效钾呈正相关关系。分析养分与各培养基之间关系可知,改良高氏(G)、甘油 -天门冬酰胺(L)、R2A(R)和改良高氏二号(E)培养基分离的放线菌数量与全氮、铵态氮呈正相关关系,与pH、速效磷、速效钾呈正相关性,而与有机质和硝态氮呈负相关关系。海藻糖-脯氨酸(D)与各养分之间均呈负相关关系。

综合分析可知,改良高氏(G)、甘油-天门冬酰胺(L)、R2A(R)和改良高氏二号(E)培养基分离放线菌数量与速效磷相关性较好,且南北坡均表现出正相关关系;与有机质相关性南北坡均表现出负相关关系;与全氮、铵态氮相关性较好,与pH、速效钾相关性一般,且相关关系均表现出北坡负相关,南坡正相关。海藻糖-脯氨酸(D)与各养分相关关系均不显著。

表5 北坡分离放线菌数量与土壤养分指标相关关系Table 5 Relationship between actinomycete quantity and soil nutrients on the north slope

表6 南坡分离放线菌数量与土壤养分指标相关关系Table 6 Relationship between actinomycete quantity and soil nutrients on the south slope

3 讨论与结论

吕世丽[12]等研究表明秦岭牛背梁自然保护区不同海拔土壤养分状况存在差异,各养分含量的最大值多出现在海拔1 900~2 000m,各养分含量随海拔高度的变异规律存在差异。本研究发现,秦岭主峰太白山南北坡土壤养分大体呈现中海拔林地含量相对较高,低海拔林地与高海拔林地含量相对较低,即自低海拔至高海拔不同林地类型土壤养分整体呈现先升高后降低的趋势,这与土壤中分离的放线菌数量的规律相一致。

有研究表明,高氏一号非常适合放线菌尤其是链霉菌的生长,腐殖酸、酵母膏作为碳源能分离多个属的放线菌,海藻糖作为碳源有利于分离稀有放线菌[13-16],在太白山不同海拔高度土壤中生存着大量拮抗性放线菌[17]。本研究所用五种培养基中,分离放线菌效果最好的是甘油-天门冬酰胺培养基(L),该培养基在分离数量及种类上均占优,数量最高可达258×104cfu·g-1土,分离种类最多为35种;改良高氏培养基(G)在南坡的分离效果整体优于北坡,更适用于分离南坡林地土壤的放线菌;R2A培养基(R)更适合分离中高海拔林地放线菌;海藻糖-脯氨酸培养基(D)在分离放线菌数量及种类都较少,但其分离得到的放线菌形态奇特,具体需进行后续分子生物学鉴定分析。南北坡不同林地类型分离放线菌效果均表现出随着海拔升高先升高后降低的趋势。中海拔林地类型,如北坡的红皮桦、牛皮桦,南坡的牛皮桦,分离的放线菌数量均显著高于其它林地类型,最高海拔的高山草甸分离的放线菌数量最少。

放线菌数量及种类与土壤养分相关性不同。有研究表明土壤放线菌数量与有机质、全氮、全磷、速效氮、速效磷含量呈极显著或显著正相关关系[18-20],也有研究表明放线菌含量与有机质、全氮呈负相关关系[21]。本研究发现,分离放线菌数量与速效磷相关性较好,且南北坡均表现出较好的正相关关系;坡向对放线菌的分离效果与土壤养分的关系密切,放线菌分离效果与全氮、铵态氮相关性较好,pH、速效钾相关性一般,且相关关系均表现出北坡负相关,南坡正相关。其原因可能是光照,温度,降雨综合影响土壤养分含量,导致局部环境差异较大,进而导致土壤养分与分离效果相关关系在南北坡呈现较大差异。

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Study on method of actinomycetes isolation from soils of Taibai mountain and its ecological distribution

WANG He,PENG Chu,LAIHang-xian,WEIXiao-min,JIANG Ying-ying
(College of Nɑturɑl Resourcesɑnd Environment,Northwest A&F University,Yɑngling,Shɑɑnxi 712100,Chinɑ)

The study explored themethod of actinomycetes isolation from soils of Taibaimountain through fivemedias,includingmodification No.1media、glycerin-asparaginemedia、R2Amedia、modification No.2mediaand trehalose-prolinemedia,and analyse its ecological distribution.The result showed that,soil nutrientof Taibaimountain on both north and south slope presented a relatively high concentration inmid-elevation forest type,themaximum concentration of organicmatter and total nitrogen was77.81 g·kg-1and 5.35 g·kg-1,respectively,a relatively low concentration in the both sites ofaltitude,organicmatter and totalnitrogen concentration were lowestat11.77 g·kg-1and 0.85 g·kg-1,respectively,whichmeans from low to high elevation in different forest types soilnutrientpresented a trend of reducing then rising as awhole;Analysis of actinomycetes number and variety on different soils of plant types showed thatmodification glycerin-asparaginemedia was apparently higher than that from others,with the quantity of 258×104cfu·g-1soil,35 species kinds,Modification No.1media showed a better separation effect on the south slope,whichmeanmore suitable for the separation of the south slope of different forestsoil actinomyces.There are obvious advantages of R2Amediawhile isolatingmid-elevation forest type.Mid-elevation forest type,such as red birch、betula utilise in north slope,betula utilise in south slope,represented a significant difference than other types on the number of isolated actinomycetes.Soil available phosphorus and total nitrogen concentration had a greater influence on the number and variety isolated from soils,slope affected the correlation between isolation result and soil nutrients.

soil nutrient;actinomycetes;isolationmethod;ecological distribution;Taibaimountain

S154.3

A

1000-7601(2017)05-0107-08

10.7606/j.issn.1000-7601.2017.05.16

2016-06-16

2016-10-27

王 鹤(1989—),女,吉林扶余人,硕士,研究方向为微生物资源与利用。E-mail:821022301@qq.com。

来航线(1964—),男,陕西礼泉人,副教授,博士生导师,主要从事微生物资源与利用研究。E-mail:laikangxian@163.com。

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