调味粉中罂粟碱LAMP检测方法建立及试剂盒研制
2017-12-13杨柳陈宇飞王磊
中国调味品 2017年12期
杨柳,陈宇飞,王磊
(吉林工商学院 食品工程学院,长春 130507)
调味粉中罂粟碱LAMP检测方法建立及试剂盒研制
杨柳,陈宇飞,王磊
(吉林工商学院 食品工程学院,长春 130507)
建立调味粉中罂粟碱LAMP(loop-mediated isothermal amplification of DNA,LAMP)检测方法,并研制出配套试剂盒。根据罂粟碱的特异性基因序列设计引物,对12种罂粟、11种香辛料和1种虞美人核酸样品进行特异性、最佳温度筛选及敏感性实验,根据优化后的反应条件,组装试剂盒,并采用试剂盒对市售的8种调味粉进行检测。结果表明:12种罂粟和虞美人发生了特异性反应,最佳反应温度为65 ℃,LAMP检测最低浓度达70 pg/μL,敏感性是PCR检测的10倍。市售8种调味粉中,有1种含有罂粟碱成分。实验所建立的检测方法及研制的试剂盒对调味粉中掺加罂粟粉检测具有重要意义。
调味粉;罂粟碱;LAMP;浊度法;荧光法;试剂盒
食品行业中某些不法商贩,为了牟取暴利,利用罂粟壳的成瘾特性,在食品尤其是火锅香料、调料中进行了添加,对消费者的身体和心理造成严重的伤害[1]。罂粟为一年生草本植物,含有的生物碱包括罂粟碱、吗啡、那可丁等20多种[2]。其中,罂粟碱是自然界中存在的一种重要的苄基异喹啉类生物碱,在阿片类植物如罂粟的壳和籽中含量较高[3],久服易成瘾,过量摄入会引起心律不齐[4]。
对于罂粟碱等生物碱的检测,国内并无统一的国家标准,给食品监督管理工作带来难度[5]。文献中关于食品掺加罂粟碱的检测方法有高效液相色谱法[6]、PCR法[7]、酶联免疫法[8]等,这些方法存在灵敏度低、干扰严重、操作繁琐、检测时间长等问题[9]。……
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