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·论著·

多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色技术检测病毒性脑炎脑膜炎病原体

樊欢，戚宇华，朱政，崔仑标，葛以跃，赵康程，吴涛，史智扬

目的建立一种病毒性脑炎脑膜炎病原体多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色的检测方法。方法针对几种重要的脑炎脑膜炎病毒(东方马脑炎病毒、西方马脑炎病毒、流行性乙型脑炎病毒、西尼罗病毒和尼帕病毒)保守区基因设计引物，进行多重PCR反应、核酸侵入反应及纳米金显色反应，对多种脑炎脑膜炎病毒同时进行检测，以森林脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒4种病原核酸评价其检测特异性，以体外转录的病毒RNA或扩增的PCR片段评价其检测敏感性, 并对流行性乙型脑炎患者临床标本进行检测。结果成功建立了一种脑炎脑膜炎病毒多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色的检测技术。建立的检测方法可特异的检测目的病原体，且与森林脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒无交叉反应。该方法对不同靶标的检测灵敏度均为103拷贝/μL, 临床标本检测结果均为阳性。结论建立的脑炎脑膜炎病毒多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色技术的检测方法，具有较高的检测特异性及灵敏度，检测通量高，肉眼即可观察结果，在传染病病原体检测方面具有广阔的应用前景。

病毒性脑炎脑膜炎；多重PCR；核酸侵入反应；纳米金显色

病毒感染引起的神经系统损伤已经逐渐成为临床上最常见的中枢神经系统感染性疾病。……