孙 云， 柳 刚， 蒋雅丽， 张 斌， 赵 璇， 李学刚

(山东大学第二医院肾内科， 山东 济南 250033)

红细胞生成素抑制活性氧诱导的红细胞衰亡*

孙 云， 柳 刚△， 蒋雅丽， 张 斌， 赵 璇， 李学刚

(山东大学第二医院肾内科， 山东 济南 250033)

目的观察红细胞生成素(erythropoietin, EPO)对过氧化氢(H2O2)刺激后红细胞衰亡(eryptosis)和红细胞中活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)生成的影响，并探讨其可能机制。方法将1%健康人红细胞悬液在以下3组不同的体外培养液中孵育：对照组(C组，培养基为PBS液)、H2O2组(H组，培养基为H2O2终浓度100 μmol/L的PBS液)和EPO组(E组,培养基为H2O2终浓度100 μmol/L、EPO终浓度2×104U/L的PBS液)。分别在孵育24 h和60 h时，留取红细胞以备检测。使用流式细胞术检测红细胞的衰亡率、红细胞内ROS和红细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)，观察各检测指标的变化并分析其相关性。结果红细胞衰亡率在C组随孵育时间延长而增加，在相同观察时点，H组较C组明显增加(P<0.01)，E组较H组明显降低(P<0.01)。H组红细胞的ROS 生成较C组明显增多，[Ca2+]i较C组明显升高(P<0.01);E组红细胞的ROS生成较H组明显减少，[Ca2+]i较H组明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论H2O2诱导健康红细胞加速衰亡，而EPO可以抑制H2O2诱导的红细胞衰亡，其机制可能与抗氧化及 [Ca2+]i的改变有关。

过氧化氢； 红细胞衰亡； 红细胞生成素； 活性氧簇； 细胞内钙离子浓度

红细胞生成素(erythropoietin，EPO)分泌相对或绝对不足是导致慢性肾功衰竭患者发生贫血的最主要原因[1]，故EPO 的定期体内补充[2]是迄今以来治疗肾性贫血的最有效和最广泛的方法。EPO作为红系祖细胞生成阶段的刺激因子，它治疗贫血的主要机理是在骨髓中血细胞分化初始阶段刺激红系祖细胞分化。近年发现，EPO这种内分泌激素还具有其它多种特性，包括促进血管增生[3]、抗氧化[4-6]和抗凋亡[7-8]等。慢性肾衰阶段，尤其在进入替代治疗之后，体内环境中的氧化应激状态不仅持续存在，并且逐渐加剧，导致过氧化产物生成过多，抗氧化产物不足。……