千金藤素通过调节miR-150和miR-182促进A549细胞凋亡*
2017-11-22郝瑞敏谢书阳韩婉虹阎云飞孙允霄李有杰
郝瑞敏, 谢书阳, 韩婉虹, 阎云飞, 孙允霄, 岳 真, 马 颖, 李有杰
(滨州医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室, 生物化学与分子生物学教研室, 山东 烟台 264003)
千金藤素通过调节miR-150和miR-182促进A549细胞凋亡*
郝瑞敏, 谢书阳, 韩婉虹, 阎云飞, 孙允霄, 岳 真, 马 颖, 李有杰△
(滨州医学院山东省高校肿瘤分子生物学重点实验室, 生物化学与分子生物学教研室, 山东 烟台 264003)
目的探讨千金藤素对人肺癌A549细胞生长的影响及可能机制。方法千金藤素处理A549细胞后,采用MTT法检测细胞生长抑制率;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡;real-time PCR检测微小RNA(miR)-150、miR-182、p53 mRNA和FOXO1 mRNA的表达变化;通过软件预测miR-150和miR-182的下游靶基因;采用Western blot法分析细胞中p53和FOXO1蛋白表达的变化。结果在千金藤素作用下,A549细胞生长受到抑制,凋亡率明显增加;千金藤素作用后,细胞内miR-150和miR-182的表达水平显著下降;在10 μmol/L的千金藤素作用后,细胞内p53和FOXO1的表达水平升高,而在30 μmol/L时,细胞内p53和FOXO1的表达水平降低;在细胞内转染miR-150后,p53表达明显减少,而转染miR-182后,FOXO1表达显著降低。结论千金藤素能够抑制A549细胞生长,促进A549细胞凋亡,可能是通过抑制miR-150和miR-182表达发挥作用;而miR-150和miR-182可能分别通过下调p53和FOXO1的表达发挥作用。
千金藤素; 微小RNA-150; 微小RNA-182; p53; FOXO1
千金藤素(cepharanthine,CEP)是从千金藤属植物千金藤、地不容和白药子中提取出的一种双苄基异喹啉类生物碱。千金藤素通过刺激动物网状内皮系统、活化造血组织和促进骨髓组织增生,起到促进白细胞升高的作用,在临床上主要用于治疗矽肺和癌症患者化疗后白细胞减少[1]。……
