耿慧霞, 李莺歌， 石贞玉， 厉永强， 王 来△

(河南大学 1护理与健康学院， 2生命科学学院， 河南 开封 475001)

PGC-1α过表达逆转OGD/R诱导的神经元线粒体功能降低和凋亡*

耿慧霞1, 李莺歌2， 石贞玉1， 厉永强1， 王 来2△

(河南大学1护理与健康学院，2生命科学学院， 河南 开封 475001)

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)基因过表达对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经元线粒体功能及细胞凋亡的影响。方法采用RT-PCR的方法从C57BL/6乳鼠大脑皮层获取PGC-1α的全基因序列，并克隆到真核表达载体pEGFP-N1上，经PCR初步鉴定后转染原代皮层神经元，Western blot鉴定PGC-1α的表达情况，成功构建PGC-1α真核表达载体pEGFP-N1-PGC-1α。分别将转染pEGFP-N1和pEGFP-N1-PGC-1α载体的皮层神经元进行OGD/R处理，分别采用MitoTracker Red染色、流式细胞术、ATP代谢检测试剂盒和TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测线粒体质量分数、活性氧簇(ROS)和ATP生成、细胞凋亡以及caspase-3激活的变化。结果PGC-1α过表达可抑制OGD/R诱导的神经元线粒体生成能力的降低和ROS的生成(P<0.05)，增强ATP的合成能力(P<0.01)，抑制神经元的凋亡(P<0.01)并降低caspase-3的激活(P<0.05)。结论PGC-1α过表达可通过促进线粒体生成、抑制ROS的产生和维护线粒体功能而抑制OGD/R诱导的神经元凋亡。PGC-1α可以作为开发脑缺血再灌注损伤药物的靶标之一。

过表达； 皮层神经元； 氧糖剥夺/复氧； 细胞凋亡； 过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α

脑卒中是心脑血管疾病中最严重的疾病类型，占心脑血管疾病死亡患者的三分之一，严重威胁着人类的身体健康。然而，目前对脑卒中患者神经元损伤和凋亡的机制研究表明，兴奋性毒性、Ca2+超载、氧自由基形成和炎症损伤等都不能完全阐明该病理过程，因此在临床上对该疾病的治疗缺少有效的治疗药物。最近的研究表明，脑缺血再灌注后，神经元内线粒体生成能力降低、超微结构破坏和动力学内稳态紊乱等引起的线粒体功能降低，导致能量枯竭，以及线粒体凋亡途径的激活可能是脑缺血再灌注后神经元损伤和凋亡的重要机制之一[1-5]。……