郁 峰， 徐统球， 陈诚豪， 崔焌辉

(浙江省立同德医院肛肠科， 浙江 杭州 310012)

川楝素与γδ T细胞协同抗结直肠癌的作用及机制研究

郁 峰， 徐统球， 陈诚豪， 崔焌辉△

(浙江省立同德医院肛肠科， 浙江 杭州 310012)

目的探讨γδ T细胞对结直肠癌细胞的杀伤活性,并研究川楝素对γδ T细胞的协同效应。方法体外培养人γδ T细胞并用流式细胞术进行鉴定。乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测γδ T细胞和川楝素对人结直肠癌SW480细胞的杀伤活性。Western blot实验检测川楝素对SW480细胞中Bcl-2、Bcl-xL和MCL-1表达水平的影响。 ELISA实验检测川楝素是否影响γδ T细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和Fas配体(FasL)的分泌。流式细胞术检测川楝素和γδ T细胞处理后SW480细胞的线粒体膜电位和凋亡情况。Western blot实验检测川楝素和γδ T细胞处理后SW480细胞caspase-9和caspase-3的活化。结果体外培养的γδ T细胞高表达CD3和γδ T细胞受体(TCR)。川楝素处理能显著增强γδ T细胞对SW480的杀伤活性。川楝素不影响γδ T细胞TRAIL和FasL的表达。川楝素不影响SW480细胞中Bcl-2和Bcl-xL的蛋白水平但显著抑制MCL-1的表达。转染MCL-1质粒能显著抑制川楝素对γδ T细胞的协同效应。川楝素通过抑制MCL-1的表达促进γδ T细胞对SW480细胞线粒体膜电位的损伤和凋亡的诱导。川楝素通过抑制SW480细胞MCL-1的表达促进γδ T细胞对SW480细胞caspase-9和caspase-3的活化。结论川楝素通过抑制MCL-1的表达发挥对γδ T细胞的协同抗结直肠癌作用。

川楝素; MCL-1; γδ T细胞; 结直肠癌

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，发病率占胃肠道肿瘤的第3位。由于其转移性很强，且早期症状不明显，因此结直肠癌的致死率非常高[1-2]。对于早期结直肠癌，手术是最有效的治疗手段，然而很多患者在确诊结直肠癌时已发生转移，对于这些患者而言，化疗或免疫治疗是不可缺少的替代治疗手段[3-4]。……