宋 凌， 周 强， 李 娜， 余 洁， 李 阳， 张 翅

(1商丘医学高等专科学校， 河南 商丘 476100； 2郑州市儿童医院， 河南 郑州 450052)

沉默Smo基因对人宫颈癌HeLa细胞活力及凋亡的影响*

宋 凌1△， 周 强2， 李 娜1， 余 洁1， 李 阳1， 张 翅1

(1商丘医学高等专科学校， 河南 商丘 476100；2郑州市儿童医院， 河南 郑州 450052)

目的使用RNA干扰技术沉默Smoothened(Smo)基因，探讨其对宫颈癌HeLa细胞活力和凋亡的影响。方法采用SmoshRNA转染宫颈癌HeLa细胞；采用RT-PCR和Western blot技术检测各组HeLa细胞Smo和转录因子Gli1的mRNA和蛋白表达；采用MTT比色法测定沉默Smo后细胞生长的情况；流式细胞术检测SmoshRNA对细胞周期和凋亡的影响。结果与对照组比较，SmoshRNA转染细胞72 h后，Smo和Gli1的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。Smo基因沉默后，HeLa细胞的活力明显降低，细胞明显阻滞于G0/G1期，细胞凋亡率显著升高。结论沉默Smo基因可有效抑制人宫颈癌HeLa细胞生长，并诱导其凋亡。

Smo基因； 宫颈癌； RNA干扰； 细胞凋亡

在世界范围内，宫颈癌是妇女第二常见的恶性肿瘤，也是妇女发病和死亡的主要原因之一[1]。诊断为IIB期～IVA期宫颈癌患者的标准治疗方法是基于顺铂的化疗和放疗， 然而，5年生存率只有66%[2]。目前对复发和转移性疾病患者的治疗方法仍有限，这些宫颈癌患者总生存期<12个月[3-5]。迄今为止，生物治疗虽能够有限地提高患者的生存率[6-7]，但是仍然需要寻找潜在的新靶点和新的治疗策略。

Hedgehog (Hh)是高度保守的信号通路。它在人的胚胎发育、器官形成、组织分化以及组织修复中起重要作用。Smoothened(Smo)蛋白是Hh信号通路上的膜蛋白，也是Hh信号通路的转化分子，它可以将细胞外的Sonic hedgehog(Shh)信号转化成细胞内的Gli信号，触发细胞内信号，激活转录因子Gli1，并能激活Shh信号通路[8-9]。当Smo基因过表达时，可异常激活Hedgehog通路，产生大量促癌因子[10]，使细胞发生转化和恶变。许多研究发现，由Smo介导的Hh信号转导途径异常激活，与许多恶性肿瘤的发生和发展密切相关，例如黑素瘤、胰腺癌、胃癌、 前列腺癌、乳腺癌、结肠直肠癌和宫颈癌等[11]。……