翟娜娜， 黄器伟， 陈奎生

(1黄河科技学院， 河南 郑州 450099； 2郑州大学第一附属医院， 河南 郑州 450052)

毛钩藤碱对缺氧乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响*

翟娜娜1， 黄器伟1， 陈奎生2△

(1黄河科技学院， 河南 郑州 450099；2郑州大学第一附属医院， 河南 郑州 450052)

目的观察毛钩藤碱对缺氧诱导的人乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭能力的影响，并探讨其分子机制。方法选取MCF-7细胞作为研究对象，采用CCK-8法检测毛钩藤碱的细胞毒性作用；采用细胞划痕实验测量细胞迁移率；采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭力；采用Western blot法检测缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α)、Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)的蛋白表达水平；采用RT-PCR法检测HIF-1α的mRNA水平。结果自32 μmol/L开始，随着毛钩藤碱浓度的升高，MCF-7细胞存活率明显降低(P<0.05)，IC50为62.82 μmol/L；在缺氧条件下，MCF-7细胞的迁移和侵袭能力显著增强(P<0.05)，HIF-α、Snail和MMP-9蛋白表达水平明显升高(P<0.05)，E-cadherin蛋白表达水平明显下降(P<0.05)，HIF-1α的mRNA水平也显著升高(P<0.05)；除缺氧MCF-7细胞中HIF-α的mRNA水平未受影响外，上述效应均被毛钩藤碱(16 μmol/L)明显抑制(P<0.05)。结论毛钩藤碱可在体外抑制缺氧诱导的人乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭，这可能与毛钩藤碱下调HIF-1α、Snail和MMP-9蛋白表达水平，上调E-cadherin蛋白表达水平有关。

毛钩藤碱； 乳腺癌； 缺氧； 细胞迁移； 细胞侵袭

在恶性实体肿瘤的演进过程中，由于恶性肿瘤细胞增殖速度快以及肿瘤组织自身供血相对不足，恶性实体肿瘤的组织内部往往普遍处于缺氧状态[1]。缺氧微环境可通过调控多个基因表达导致肿瘤细胞间的黏附下降、肿瘤细胞的迁移和侵袭能力增强，缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor-1，HIF-1)正是其中最重要的调节因子之一[2]。乳腺癌是女性最常见的恶性实体肿瘤之一。在欧盟和美国，2017年女性乳腺癌预计死亡人数在所有女性癌症中位居前两位，将分别达到92 600例和40 610例[3-4]。因此抑制乳腺癌细胞侵袭和转移、改善乳腺癌患者的预后仍是目前亟待解决的问题。从天然植物中筛选出具有抗肿瘤作用的活性成分一直是癌症研究的一个重要领域。……