高 稳， 李 剑， 倪唤春， 刘俊岭， 罗心平

(复旦大学附属华山医院心内科， 上海 200040)

ERK5对体外血小板活化及在体血栓的影响*

高 稳， 李 剑， 倪唤春， 刘俊岭， 罗心平△

(复旦大学附属华山医院心内科， 上海 200040)

目的探讨细胞外信号调节激酶5(ERK5)对体外血小板聚集及在体血栓的影响及机制。方法采用Western blot对人血小板中ERK5的表达及其在血小板活化后的磷酸化水平进行检测；采用血小板聚集仪检测ERK5特异性抑制剂XMD8-92对血小板聚集及致密颗粒释放的影响；采用FeCl3颈动脉血栓模型检测ERK5对在体血栓的影响；采用Western blot检测XMD8-92对蛋白激酶B(Akt)和人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白(PTEN)磷酸化的影响。结果人血小板中存在ERK5的稳定表达，其磷酸化水平在血小板活化后显著升高(P<0.05)。XMD8-92可抑制多种血小板激活剂引起的血小板聚集和致密颗粒释放(P<0.05)。Western blot结果表明，XMD8-92可通过下调PTEN Ser370位点磷酸化而增强PTEN的活性，从而抑制Akt的磷酸化，这种抑制效果也通过血小板特异PTEN基因敲除小鼠得到了验证。在体血栓研究表明，XMD8-92经尾静脉给药，可显著延长小鼠第一次颈动脉血栓的形成时间。结论ERK5可通过影响PTEN的磷酸化调节Akt的活化，进而影响到体外血小板的聚集和在体血栓的形成。

细胞外信号调节激酶5； 血小板； 血栓； 人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源蛋白

心血管疾病是人类健康的重大威胁，《中国心血管病报告2015》表明，2014年心血管病死亡率仍为我国各疾病之首，占居民死亡构成的主要部分(农村为44.60%，城市为42.51%)，其死亡率仍然高于肿瘤及其它疾病[1]。其中，急性心肌梗死的发病率和死亡率占到心血管疾病的首位，在心肌梗死的发病过程中，血小板的异常活化是急性血栓事件发生的起始因素，因此深入研究血小板的活化通路及调控机制对研发新型抗栓药物并阐明动脉血栓的发生机制都有重要意义[2]。

丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPK)信号通路在血小板活化中有重要作用，它负责承……