康攀攀， 刘映雪， 郭甜甜， 张公安， 李东轩， 田 华， 周 健， 秦树存△， 姚树桐, △

(泰山医学院 1动脉粥样硬化研究所， 2人口与计划生育学院， 3口腔医学院，4生命科学学院， 5基础医学院， 山东 泰安 271000； 6承德医学院附属医院， 河北 承德 067000)

大蒜素通过抑制caspase-12减轻巨噬源性泡沫细胞凋亡*

康攀攀1, 6， 刘映雪2▲， 郭甜甜3， 张公安4， 李东轩5， 田 华1， 周 健6， 秦树存1△， 姚树桐1, 5△

(泰山医学院1动脉粥样硬化研究所，2人口与计划生育学院，3口腔医学院，4生命科学学院，5基础医学院， 山东 泰安 271000；6承德医学院附属医院， 河北 承德 067000)

目的研究大蒜素对巨噬源性泡沫细胞凋亡和内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)凋亡通路关键分子半胱天冬酶-12(caspase-12)的影响，并探讨可能的分子机制。方法体外培养RAW264.7巨噬细胞，分别给予大蒜素(12.5、25和50 mg/L)和4-苯丁酸(4-phenylbutyric acid，PBA；4 mmol/L)预处理1 h后，加入氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL； 100 mg/L)或衣霉素(tunicamycin，TM；4 mg/L)处理24 h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞活力和凋亡情况；采用相应的试剂盒测定细胞内caspase-3和培养液中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase，LDH)的活性；采用Western blot技术检测caspase-12的表达变化；油红O染色检测细胞内脂质蓄积；酶比色法测定细胞内总胆固醇含量。结果与ERS抑制剂PBA相似，大蒜素可减轻ox-LDL所致的巨噬细胞损伤，表现为细胞活力增加、LDH漏出减少、细胞凋亡率和caspase-3活性降低(P<0.05)；ERS诱导剂TM可导致巨噬细胞活力下降，LDH漏出增多及细胞凋亡率升高(P<0.05)，大蒜素可明显阻断TM的上述作用；大蒜素明显抑制ox-LDL所致的caspase-12活化(P<0.05)；与TM组相比，大蒜素也可显著抑制TM所诱导的caspase-12活化(P<0.05)。另外，大蒜素还可显著抑制ox-LDL所诱导的巨噬细胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成(P<0.05)。结论大蒜素可减少 ox-LDL 所致的巨噬源性泡沫细胞凋亡，其机制可能与抑制caspase-12活化有关。

大蒜素； 半胱天冬酶-12； 氧化低密度脂蛋白； 巨噬细胞； 细胞凋亡

动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是心脑血管疾病的主要病理基础，AS斑块破裂是导致急性心血管事件如心源性猝死和急性心肌梗死的主要原因，而斑块中巨噬源性泡沫细胞凋亡因可促进斑块坏死核心增大、减少细胞外基质的分泌而成为斑块不稳定性的重要因素[1]。……