魏子龙 狄冲 楼美清 赵耀东

·基础研究·

五味子甲素通过ATP结合盒转运子B1逆转胶质瘤干/祖细胞耐药性研究

魏子龙 狄冲 楼美清 赵耀东

目的探讨五味子甲素对胶质瘤干/祖细胞耐药性的影响及作用机制。方法自人胶质瘤细胞系SHG⁃44中分离培养胶质瘤干/祖细胞SHG⁃44s，予五味子甲素0、12.50、25.00和50.00 μmol/L 联合长春新碱400、800和1200 nmol/L，细胞活性检测试剂盒CCK⁃8细胞毒性实验检测SHG⁃44s细胞增殖活性，罗丹明123染色检测SHG⁃44s细胞泵出药物能力，实时聚合酶链反应（PCR）和Western blotting法检测SHG⁃44s细胞ATP结合盒转运子B1（ABCB1）基因转录和翻译能力。结果五味子甲素50 μmol/L即可抑制SHG⁃44s细胞增殖活性（P=0.001，0.001，0.039），剔除这一浓度后无论长春新碱浓度为400、800或1200 nmol/L，联合应用五味子甲素均可抑制SHG⁃44s细胞增殖活性（长春新碱400 nmol/L组：P=0.007，0.001；长春新碱800 nmol/L组：P=0.001，0.000；长春新碱1200 nmol/L组：P=0.000，0.000）。倒置荧光显微镜观察，五味子甲素12.50 μmol/L组和25.00 μmol/L组SHG⁃44s细胞可见明显绿色荧光。流式细胞术显示，随着五味子甲素浓度的增加，SHG⁃44s细胞罗丹明123染色阳性细胞比例分别为10.40%、39.20%和45.20%。实时PCR法显示，五味子甲素12.50 μmol/L组和25.00 μmol/L组SHG⁃44s细胞ABCB1基因表达水平较 0 μmol/L组降低（P=0.027，0.006），尤以 25.00 μmol/L组显著（P=0.034）。Western blotting法显示，随着五味子甲素浓度的增加，SHG⁃44s细胞P⁃糖蛋白表达水平下降。结论五味子甲素通过抑制胶质瘤干/祖细胞表面已存在的ABCB1基因编码的P⁃糖蛋白泵出药物能力并降低ABCB1基因转录和翻译能力，逆转胶质瘤干/祖细胞耐药性。

五味子素； ATP结合匣式转运子； 神经胶质瘤； 肿瘤干细胞； 药物耐受性； 显微镜检查，荧光； 流式细胞术； 聚合酶链反应； 免疫印迹法； 肿瘤细胞，培养的

胶质瘤是临床最常见的原发性中枢神经系统肿瘤（约占50%），患者预后较差。……