黄银莉 周洪 苏晓霞 钟天宇

人脐带Wharton’s Jelly来源间充质干细胞与人牙周膜干细胞成骨分化能力的对比研究

黄银莉 周洪 苏晓霞 钟天宇

目的比较人脐带Wharton’s Jelly来源间充质干细胞(human umbilical cord Wharton’s Jelly-derived mesechymal stem cells, hUCWJMSCs)与人牙周膜干细胞(periodontal mesenchymal stem cells,hPDLSCs)成骨分化能力。方法体外培养hUCWJMSCs和hPDLSCs。MTT法检测细胞增殖情况；成骨诱导后测定细胞的ALP活性，茜素红染色检测细胞矿化能力，Real-time PCR分析OPN和Runx2基因的表达。结果hUCWJMSCs增殖能力高于hPDLSCs； 经矿化诱导后hPDLSCs ALP表达、矿化结节形成高于hUCWJMSCs(P<0.05)；Runx2在hPDLSCs中表达高于hUCWJMSCs(P<0.05)；而hUCWJMSCs中OPN表达高于hPDLSCs(P<0.05)。结论hUCWJMSCs、hPDLSCs均具有成骨分化能力，hPDLSCs成骨分化能力较强。

人脐带Wharton’s Jelly间充质干细胞(hUCWJMSCs)； 人牙周膜干细胞(hPDLSCs)； 成骨分化

口腔颌面部骨组织工程技术中种子细胞的选择一直是研究的重点[1-2]。牙周膜干细胞多用于牙周骨组织缺损的研究，但因其来源受限、细胞产量较低、存在混杂细胞等缺点，故寻找新的替代种子细胞成为研究重点。人脐带Wharton’s Jelly来源间充质干细胞(human umbilical cord Wharton’s Jelly-derived mesechymal stem cells,hUCWJMSCs)在细胞增殖、多向分化、免疫特性以及旁分泌等方面更具优势，引起广泛关注[3]；其成骨能力已被证实并应用于骨组织工程，被认为是一种新的骨组织种子细胞[4-5]。本实验通过体外研究，比较hUCWJMSCs与人牙周膜干细胞(periodontal mesenchymal stem cells,hPDLSCs)成骨分化能力，探讨hUCWJMSCs应用于牙周骨组织工程的可行性。

1 材料与方法

1.1 材料

DMEM/F12培养基、胎牛血清、胰酶(Gibco公司,美国)，地塞米松、茜素红、β-甘油磷酸钠、L-抗坏血酸2-磷酸盐(Sigma公司，美国)，总RNA提取试剂盒(Invitrogen公司，美国)，引物合成、PCR试剂盒、cDNA合成试剂盒(Takara公司，日本)，ALP半定量试剂盒(南京建成生物技术公司)，倒置相差显微镜(Nikon,日本)。

1.2 实验方法

1.2.1 MTT法检测 hUCWJMSCs、hPDLSCs增殖能力

脐带来源：健康足月产妇中获得新鲜脐带，实验获得西安交通大学口腔医院伦理委员会批准，患者对其用途均知情同意。……